实验动物各种---、的采集方法

---液的采集

(一) 唾液

1. 直接抽取法 在---实验中， 可用吸管直接插入动物口腔或唾液腺导管抽吸唾液，此法非常简单，但从口腔抽吸唾液会有杂质混入。

2. 制造腮腺瘘法 在慢性实验中,收集狗的唾液，要用手术方法将腮腺导管开口移向体外，即以腮腺导管为中心，切成一直径约2～3cm的圆形粘膜片，将此粘膜片，与周围组织分开，穿过皮肤切口引到颊外,将带有导管开口的粘膜片与周围的皮肤缝合,腮腺分泌的唾液就流出颊外。24h后用yi醚浅麻zui大鼠，颈部常规消毒，打开颈前正中切口，将套在双侧颈总动脉下的备用线结扎,根据实验需要可阻断血流10?60min。这种方法可以收集到较纯净的唾液。

(二)胃液

1. 直接收集胃液法 ---实验时，先将动物，将插胃管经口插入胃内,在灌胃管的出口连一，用此可收集到胃液,此法适用于狗等大型动物。动物模型的设计原则重复性理想的动物模型应该是可重复的，甚至是可以标准化的。如是大鼠,需手术剖腹，从幽门端向胃内插入一塑料管，再由口腔经食道将一塑料管插入前胃，用ph7.5、35℃左右的生理盐水，以12ml/h的流速灌胃，收集流出液，进行分析。

2. 制备胃瘘法 在慢性实验中,收集胃液多用胃瘘法,如全胃瘘法、巴氏小胃瘘法、海氏小胃瘘法等。制备小胃是将动物的胃分离出一小部分，缝合起来形成小胃，主胃与小胃互不相通，主胃进行正常---，从小胃可收集到纯净的胃液。实验动物的除毛一、实验动物的除毛在动物实验中，被毛有时会影响实验操作与观察，因此必须除去。应用该法，可以待动物恢复健康后，在动物清醒状态下反复采集胃液。

(三)胰液和胆汁

在动物实验中，主要是通过对胰总管和胆总管的插管而获得胰液或胆汁。狗的胰总管开口于十二指肠降部，在紧靠肠壁处切开胰管，结扎固定并与导管相连，即可见无色的胰液流入导管。造模后4d，以tunel法检测大鼠视网mo和视神经细胞凋亡，造模后7d，rt-pcr、western-blot检测视wang膜和视神经节细胞组织caspase-3、bcl-2基因和蛋白表达。大鼠的胰管与胆管汇集于一个总管，在其入肠处插管固定，并在近肝门处结扎和另行插管，可分别收集到胰液和胆汁。

有时也可通过制备胰瘘和胆囊瘘来获得胰液和胆汁。

1 被动---模型

(1)方法  实验---(雌雄不限)，将---置放在封闭的通气隔离包中，每天暴露在xiang烟烟雾环境中(10支/次，1次/d，5d/周，连续1, 3, 6, 12个月作肺组织病理学及肺功能检查)，即可建立模拟人类---引起的动物模型。

(2)模型特点  本模型病理表现 为进行性肺泡腔扩大、肺功能减退，造模12个月后即使停止给予动物烟雾暴露环境，模型动物肺泡腔的病理学改变仍可呈进行性发展，不能恢复正常。模型动物出现的百分比、病变轻重程度与---时间密切相关；因模型时间较长，实验过程中影响因素较多，模型的稳定性相对较差。相反，大小白鼠、地鼠和---结扎冠脉的后果就比较稳定一致，可以预测，因而可以标准化。

2 蛋白酶模型

(1)方法  成年大鼠(雌雄不限)，经yi醚后仰卧固定头部及四肢，轻拉鼠舌，---舌腹，在额镜直视下，趁大鼠呼吸瞬间，迅速将已装有木瓜蛋白酶溶液连有的细塑料插管插入达气管分叉处，随后慢慢推入木瓜蛋白酶(2mg/kg体重)溶液，注入溶液体积控制在0.2ml/100g体重或以下。因为书中比较详细地介绍了常用实验动物的解剖生理、生物学习性等等，主要的是它为你选择什么样的实验动物提供了重要的参考。滴完溶液后，可辅助大鼠作各种直立、旋转等动作，以便所滴溶液在大鼠肺内均匀分布，然后大鼠自由饮水进食。

(2)模型特点  大鼠在造模4d后开始出现一系列的渐进理变化，肺功能检查模型大鼠第4日时的胸腔气体容积(tgv)值增加65％，而到第8日就不再变化，而造模前后大鼠气道阻力(raw)值则变化无---性差异。病理组织学检查模型大鼠在发生早期(1周以内)主要是肺泡上皮细胞发生了破坏，而在晚期阶段则可见ⅱ型肺泡上皮细胞增多，以及肺泡间隔内局限性胶原纤维及弹性纤维的---。通常用右手提起小鼠尾巴将其放在鼠笼盖或其它粗糙表面上，在小鼠向前挣扎爬行时，用左手拇指和食指捏住其双耳及颈部皮肤，将小鼠置于左手掌心、无名指和小指夹其背部皮肤和尾部，即可将小鼠固定。但本模型(犬)在测定肺功能时表明，动物呼气流速的下降与静态顺应性的下降不成比例，同时病理组织学也证实动物气道萎缩，气道病变说明本模型不是单纯性的较佳模型。

zi宫腺肌病小鼠的yao物疗xiao及其疼痛机制

　目的：了解腺肌病小鼠的药wuzhi疗liao效及疼痛机制。

　方法：他莫昔芬法建模。以不同yao物zhi疗后，监测小鼠动情周期，检测5-ht、gnrh-r、ngf、nf的水平。

　结果：对照组5-ht水平明显高于造模组。gnrh-r及ngf在正常内膜、在位内膜的表达---低于异位内膜。nf在正常内膜的表达---低于在位内膜、异位内膜。

　结论：与全量抑那通相似，半量抑那通可减缓腺肌病进展，但对动情周期影响无明显优势。全量抑那通后使用达英-35可巩固疗xiao。5-ht可能在腺肌病疼痛机制中发挥作用。

人卵l巢癌课鼠皮下移植瘤模型

造模方法

实验动物常用balb/c-nu/nu裸鼠，4～6周龄，雌性。移植材料常用人卵l巢癌细胞株skov3、ovcar3。常规培养人卵l巢l癌肿l瘤细胞株，收集处于对数生长期细胞，制成单细胞悬液。该饲料用酪蛋白或大豆作为蛋白来源，另加蔗糖、猪油、---粉、盐和定量的l-胱酸而组成。调整细胞浓度为5.0×10000000ml。用1ml注l射器将细胞悬液注入裸鼠肩胛背部等部位皮下，0.2ml/只。接种后每天观察肿l瘤生长情况。