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    2020-8-2

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分子生物学服务

 公司建有100平米分子实验室,配备有pcr仪、定量pcr仪、电泳仪、恒温培养箱、恒温摇床、垂直电泳仪、蛋白转印仪、蛋白发光成像仪等设备。分子组---毕业于农业大学、华中科技大学同济医学院、浙江理工大学等高校生物医学相关,全部具有硕士研究生以上---,熟练掌握分子生物学相关实验,可开展多种分子生物学检测服务。





分子实验室部分设备







jia基化特---的pcr

herman 等( 1996 )在使用重---酸盐处理的基础上新建的一种方法。该方法敏感性高,主要用于作定性研究。用------盐处理基因组dna,所有未发生jia基化的胞嘧定被转化为尿嘧ding,而jia基化的胞嘧定不变;随后设计针对jia基化和非jia基化序列的引物进行pcr。通过电泳检测msp扩增产物,如果用针对处理后jia基化dna链的引物能得到扩增片段,则说明该位点存在jia基化;反之,说明被检测的位点不存在jia基化。

特点:适用范围广,能够检测特异位点是否发生jia基化。

------盐测序法(bisulfite sequencing pcr,分子生物学实验,bsp)

------盐修饰后测序法( bsp ) frommer 等( 1992 )提出的研究 dna jia基化方法,南京分子生物,此方法---性及jing确度高,能明确目的片段中每一个 cpg 位点的jia基化状态。用------盐处理基因组dna,分子生物检测,所有未发生jia基化的胞嘧ding被转化为尿嘧ding,而jia基化的胞嘧ding不变。随后设计bsp引物进行pcr,在扩增过程中尿嘧定全部转化为胸腺嘧定,zui后对pcr产物进行测序就可以判断cpg位点是否发生jia基化,称为bsp-直接测序法。将pcr产物克long至载体后进行测序,可以提高测序成功率,这种方法称为bsp-ke隆测序法。

特点:jing确度高,能够准确检测出jia基化的程度百分比。





1、细胞准备:细胞传到后,密度达到70%左右时进行转染;

2、细胞转染:取两个ep管,分子生物学实验技术,一个加入opti-mem、---质粒和包装质粒;另一个加入opti-mem、lipo2000,然后将两管混匀;

3、细胞孵育:将混合液逐滴加入细胞培养皿中,混匀后孵育;

4、收集---:转染后48h、72h收集含慢---的上清;

5、滴度检测:细胞为30%-50%时加入---上清液,检测阳性细胞比例。





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