骨sui内皮祖细胞的分离培养
方法:使用密度梯度离
心法汲差速贴壁法联合的方法培养内皮祖细胞，在倒置显微镜下观察细胞生长情况及形态变化，使用dil标记的---化低密度脂蛋白和fitc标记的荆豆凝集素1双荧光染色、流式细胞仪检测细胞表面抗原cd34、cd133 表达情况.结果与结论:培养前4 d---不明显第5~10天迅速增殖，并可见细胞集落及线状结构形成培养第7天的内皮祖细胞具有吞噬dil标记的---化低密度脂蛋白和fitc标记的荆豆凝集素1的功能流式细胞仪检测体外培养第十天的细胞，动物实验外包收费，cd133+细胞占19.2%，cd34+细胞占28.7%，cd34+ /cd133+细胞占19.1%.说明密度梯度离心法联合差速贴壁法可在体外有效分离培养大鼠骨sui内皮祖细胞.
cell counting kit-8（简称cck-8）是一种基于wst-8的广泛应用于---和细胞毒性的检测试剂。wst-8化学名：2-(2-甲氧ji-4-硝ji---ji)-3-(4-硝ji---ji)-5-(2，4-二磺酸---)-2h-四唑单钠盐，是一种类似于mtt的化合物，它在电子载体1-甲氧ji-5-甲ji吩---鎓---二jia酯（1-methoxy pms）存在的情况下，南京动物实验外包，被线粒体中的脱氢酶还原为具有高度水溶性的橙黄色甲瓒产物（formazan）。---越多越快，颜色越深；细胞毒性越大，则颜色越浅，对于同样的细胞，颜色的深浅与活xi胞的数量成正比，因此可利用这一特性直接进行---和毒性分析。
透射电镜自噬小体检测
胰酶---，收集作用后的细胞，离心，先将细胞块固定在2.5%成二醛和0.1%的pbs溶液中保存在4c中过夜。
再用---梯度脱水，动物实验外包与服务，接下来用环氧树脂浸透并切成薄片。随后超薄切片用铜网固定，后用重金属---双氧---和柠檬酸铅染色。通过tem分析凋亡细胞内超微结构变化，动物实验外包室，拍照保存。
贴壁细胞:先倒出培养液，采用胰蛋白酶---或者用细胞刮(会产生碎屑)刮下:带培养液进行离心，100-1500/mim 5 10min。离心完毕倒出培养液。管底的细胞团不要打散， 沿管壁倒入适量(一般为材料体积的5-10倍)的2.5-3.5%成醒固定液，固定约1h-2h. 也可在4c冰箱过夜。
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