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    2020-8-19

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小鼠膀胱ai原位瘤动物模型建立方法


膀胱灌注法通常采用对数生长期的mb49小鼠膀胱ai细胞株作为实验材料,6-12周龄的雌性c57/bl6小鼠作为实验动物。- -般膀胱内灌注数量为:10^4-5*10^5个,10^4-10^5个, .5x10^6-4x10^6个。实验中常通过导管对经过膜处理后膀胱灌入细胞悬液--定时间后使细胞粘附于膀胱壁上,建立起小鼠原位膀胱ai模型。该方法简便有效,成瘤率相对较高。但是在膀胱粘膜完整的情况下,发癌率- -般只有10%。为提高其移植成功率,研究者通常采用膀胱粘膜损伤技术进行膀胱灌注。常用的膀胱损伤技术有电灼法,酸性溶液和胰蛋白酶灌注法(17-19)。该方法成瘤率高,具有很强的实用性,但是膀胱ai模型插管要求高,肿liu细胞容易外渗,并且膜损伤处理过后易发生膀胱内发炎现象。








动物模型设计的注意事项


注意模型要尽可能再现所要求的人类---

模型时必须强调从研究目的出发,熟悉诱发条件、宿主特征、---表现和发病机理,即充分了解所需动物模型的全部信息,分析是否能得到预期的结果。例如诱发动脉粥样硬化时,草食类动物兔需要的胆固醇剂量比人高得多,动物实验外包 价格,而且病变部位并不出现在主动脉弓。病理表现为纤维组织和---为主,可有大量泡沫样细胞形成斑块,这与人类的情况差距较大。因此要求研究者懂得,各种动物所需的诱发剂量、宿主年龄、性别和遗传性状等对实验的影响,以及动物---在组织学、生化学、病理学等方面与人类---之间的差异。要避免选用与人类对应相似性很小的动物---作为模型材料。为了增加所动物---模型与人类---的相似性,应尽量选用各种敏感动物与人类---相应的动物模型,可参考相关文章<各种敏感动物与人类相似的---模型>。







睡眠剥夺模型

实验用金属箱直径35 cm, 每箱装1只大鼠。remsd 各组分别置于直径为6.5 cm的小站台上,对照组大鼠置于直径15 cm的大站台上,周围是水环境,水深3 cm,平台在水面以上1 cm,于平台以上14 cm 处放笼罩,上面放水和食物。水温和室温保持在25 c,每日换水并打扫实验箱。remsd 组大鼠在小台上屈曲而立,南京动物实验外包,在快动眼睡眠(rapid eye movement sleep, rems) 时,由于伴随全身肌肉松弛和节律性垂头,大鼠落入水中而惊醒,再爬上站台。用此方法自18:00开始连续剥夺大鼠的rems至相应实验时间点。

 旷场实验( open field test, oft )

实验装置为高60 cm、 底面边长100 cm、内壁涂黑的无盖方箱,底面平均分为25个小方格,正上方2 m处架一---机,镜头对准箱底,实验在安静环境下进行,动物实验外包费用,大鼠置于方箱底面中心,同时进行---和计时,3 min 后停止---,更换动物后,继续进行实验。2次实验之间清洗箱壁及底面,以免上次动物余留的信息影响下次实验结果。计分方法:通过放像设备,观察大鼠3 min内越过的格子数为水平得分,后肢站立次数为垂直得分,两者之和为oft总得分。remsd实验前后均进行旷场实验。




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