英瀚斯-大分子生物检测服务-南京分子生物检测

基因组甲l基化水平(methyl ati on content)的分析:

1.高l效液相色谱(hi gh-performanceli qui dchromatography， hplc)hplc是- -种比较传统的方法，是根据dna或蛋白分子量和构象的不同而使其加以分离。由于在动态相和静态相下分子的光吸收度并不相同而加以定量。随着系统的压强的增加，其分辨率增l高。故而能够定量测定基因组整体水平dna甲l基化水平。该方法由ruo等1980年首l次---。过程是将dna样品先经---或氢l氟酸水解成碱基，水解产物通过色谱柱，结果与标准品比较，小分子生物检测服务，用紫外光测定吸收峰值及其量，计算5 mc/(5mc+5c)的积分面积就得到基因组整体的甲l基化水平。这是一种检测dna甲l基化水平的标准方法。

2.高l效毛细管电泳法(hi gh-per formance capillary electrophoresis， hpce)这是一-种利用窄孔熔融石英毛细管来从复合物中分离不同化学组分的技术。其基础是在强电场下不同分子的由于其所带电荷，大小，结构以及疏水性等不同而相互分开。用hipce方法处理dna水解产物来确定5mc水平，简便，分子生物学检测多少钱，经济且敏感性高。

microrna芯片:

rna干扰(rna interference， rnai)现象是一种进化上保守的抵御---或外来---qin犯的防御机制。将含有靶基因mrna同源互补序列的rna（double strand rna， dsrna）导入细胞后，能够特异地识别该mrna，引起mrna的降解，从而导致相应的功能缺失。rnai提供了一种经济、快捷、gao效的抑制特异基因表达的技术手段，该技术已被广泛用于研究基因功能和chuan染性---及恶xingzhong瘤基因zhi疗领域。目前常用的rna干扰手段为mirna、 shrna和sirna等。

mirna是一类可以通过rnai机制调节基因表达的内源性小rna，人工mirna与shrna的设计原理基本相同，由于mirna具有内源性，大分子生物检测服务，因此其更易产生有效的基因沉默。

技术流程：

dsrna或pre-mirna被导入细胞后，能够被一种特异的---内切酶（dicer）识别并切割成为小片段，这些片段在rna解旋酶的作用下解链。继之反义链在与体内一些酶（包括内切酶、外切酶、解旋酶等）结合形成rna---的沉默复合物（rna-induced silencing complex，risc），risc与mrna同源区进行特---结合，若mirna与mrna的结合位点配对，则切割mrna；若mirna与mrna的结合位点不配对，则抑制mrna的翻译。