大分子生物检测服务-英瀚斯-南京分子生物检测

rip

技术概述

rip是研究体内蛋白与rna互作的重要技术。该技术先用甲醛等试剂交联细胞内的“蛋白-rna”互作复合物，南京分子生物检测，裂解细胞后，用靶蛋白特异的抗l体(或标签抗l体)做免l疫沉淀，获得“靶蛋白-rna”互作复合物，去交联分离其中的rna;针对预测的靶蛋白结合rna的序列设计引物，

做qpcr实验，大分子生物检测服务，验证预测的rna是否与靶蛋白有结合，或者将分离出来的rna做高通量测序，筛选到可能与靶蛋白结合的rna。

技术流程

细胞交联-***细胞裂解-***免l疫共沉淀***去交联***rna分离***建库***高通量测序(或qpcr)。

腺相关---包装原理

腺相关---( adeno-asso---ted virus， aav)是一类细小---， 基铟组为单链dna ，对分裂细胞和非分裂细胞均具有gan染能力。通常需要腺---或疱zhen---帮助其在体内fu制扩增。重组腺相关---( recombinant aav， raav )是利用aav2型基因组与不同xue清型的衣壳蛋白基因组结合产生的混合体---载体，可将目的基因的cds区序列或者rnai干扰序列插入raav表达质粒中，包装---后gan染细胞完成对目的基因的操作。腺相关---具有gan染温和，分子生物检测技术比较好，免yi原性小，长效稳定表达的特点，主要应用于动物体内注射。源井生物提供的腺相关---颗粒经过超su离心纯化，并通过qpcr对---基因拷贝进行滴定。腺相关---的滴度在10^12~10^13gc/ml ，可以满足各类整体实验的使用要求。