brdu染色原理
brdu (5-脱氧尿核苷)是胸腺的衍生物，常用于标记中新合成的dna，可代替胸腺选择性整合到细胞中新合成的dna中(细胞周期s期)。这种掺入可以稳定存在，细胞实验 外包 ---，随着dna进入子细胞中brdu特---可以用于检测brdu的掺入，从而判断细胞的增殖能力。brdu特---可以用于检测brdu的掺入，从而判断细胞的增殖能力。
注射或细胞培养后利用抗brdu单，icc染色，显示增殖细胞。同时结合其它细胞标记物，双重染色，细胞实验外包平台，可判断增殖细胞的种类，增殖速度，对研究细胞动力学有重要意义。因组织细胞内无内源性brdu存在，所以brdu应用较广掺入双链dna内的brdu，以氢链与腺呤结合，不能直接与抗brdu反应，需经解链使brdu暴露方能被染色。常用的解链方法为---加热、蛋白酶处理等，南京细胞实验外包，使dna双链部分单链化，抗brdu小鼠单与增殖细胞核内的brdu结合，再经酶标抗小鼠igg孵育、
脂质体瞬时转染
1、细胞h9c2 (hela) 6孔板hela1x10°/孔。
2、转染前换上没有抗sheng素的dmem+胎清(10%)。
3、将质粒dna (约2-4ul) 2ul 加入dorf管中+dmem至50u1。
4、脂质体5ul补培养基至50ul混匀静止5分钟(质粒与脂质体比例为1:2或1.5:2.5)。
5、将含有脂质体的培养基与含质粒的混合总体积100ul室温放置30分钟。
6、吸取混合物均匀加入每一个孔中。
7、将6孔板放入培养箱中继续培养6小时后吸出培养基换上新配置的培养基dmem6ml+胎清600u1+三抗300u1。
8、培养24小时。
透射电镜观察自噬小体方法
利用光学显微镜，借助相应的染色方法，可以观察细胞凋亡时会出现的一系列形态特征。常用的染色法包括台盼蓝、橙 / 化乙啶（ao/eb）、giemsa 和 he 法等。在光学显微镜下可以观察到核固缩、质浓缩和凋亡小体等典型的凋亡现象。
电镜形态学观察法是一种比较---、---的方法，被认为是确定细胞凋亡的金标准。电镜下凋亡细胞表现为染色质凝集、核浓缩、核裂解、胞浆收缩和胞膜具有发泡现象及凋亡小体出现等。
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