透射电镜观察自噬小体方法
利用光学显微镜,借助相应的染色方法,可以观察细胞凋亡时会出现的一系列形态特征。常用的染色法包括台盼蓝、橙 / 化乙啶(ao/eb)、giemsa 和 he 法等。在光学显微镜下可以观察到核固缩、质浓缩和凋亡小体等典型的凋亡现象。
电镜形态学观察法是一种比较---、---的方法,被认为是确定细胞凋亡的金标准。电镜下凋亡细胞表现为染色质凝集、核浓缩、核裂解、胞浆收缩和胞膜具有发泡现象及凋亡小体出现等。
细胞实验部分设备图片
公司目前拥有多项---产品及技术,其中发明---两项,软件著作权八项,实用新型---三项,商标两件。公司先后获得“江苏省民营科技企业”、“江苏省科技型中小企业”、“江苏省专精特新中小企业”等荣誉---,连续多年被评为“东南大学大学科技园企业”。2019年公司成为江苏省生物技术协会第七届理事会的特邀理事,成立了“李冬冬---工作室”,并获得了南京市“工人先锋号”的---。
软gu细胞培养
(1)---脱颈处死,备皮,细胞实验外包平台,用75%酒精消毒背部及四肢皮肤。
(2)无菌操作下取下双侧股骨头及膝关节(保留周围肌肉,软gu不能暴露),75%酒精浸泡5分钟,转移至pbs缓冲液中,带入超净工作台,剔除关节周围附着的软组织,打开髋、膝关节,用尖刀削取关节软gu组织,置入装有pbs缓冲液的无菌培养皿,防止软gu组织被风干。
(3)pbs缓冲液充分漂洗软gu小块3次,然后用小剪刀将软gu块切碎至约imm3大小。
(4)再次用pbs缓冲液冲洗3次,南京细胞实验外包,滤干,将细小的软gu块置入放有0.2%的ii型胶原酶3ml的广口瓶里,细胞实验外包公司选择,摇匀后置于37°c恒温震荡箱中---,40分钟后将上层---液转移至15ml规格离心管中,800r/min离心5min,收集细胞(沉淀物),加入含10%的胎牛xue清dmem培养液4ml并吹打混匀,制成软gu细胞混悬液。
(5)把---所得的软gu细胞混悬液收集于离心管中,经滤网过滤后用细胞计数板计数,并把细胞混悬液密度调整为2x105/ml接种于25cm2规格的培养瓶中。将培养瓶放置于co2培养箱内。培养条件为37°c、5%co2。
(6)未---完的软gu小块继续用ii型胶原酶如_上法---,直至软gu块基本消失。
(7)每日在倒置显微镜下观察软gu细胞生长情况并拍照保存。
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