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---是指同一来源的细胞逐渐产生出形态结构、功能特征各不相同的细胞类群的过程,其结果是在空间上细胞产生差异,在时间上同一细胞与其从前的状态有所不同。---的本质是基因组在时间和空间上的选择性表达,通过不同基因表达的开启或关闭,细胞迁移检测费用,终产生---蛋白质。细胞---是指将一群不同类型或者形态结构、功能特征存在差异的细胞通过生物学、物理学等手段,将之转变为具有相似/相同形态结构、功能特征的细胞群体的过程。
骨sui内皮祖细胞的分离培养
方法:使用密度梯度离
心法汲差速贴壁法联合的方法培养内皮祖细胞,在倒置显微镜下观察细胞生长情况及形态变化,使用dil标记的---化低密度脂蛋白和fitc标记的荆豆凝集素1双荧光染色、流式细胞仪检测细胞表面抗原cd34、cd133 表达情况.结果与结论:培养前4 d---不明显第5~10天迅速增殖,并可见细胞集落及线状结构形成培养第7天的内皮祖细胞具有吞噬dil标记的---化低密度脂蛋白和fitc标记的荆豆凝集素1的功能流式细胞仪检测体外培养第十天的细胞,cd133+细胞占19.2%,cd34+细胞占28.7%,cd34+ /cd133+细胞占19.1%.说明密度梯度离心法联合差速贴壁法可在体外有效分离培养大鼠骨sui内皮祖细胞.
brdu染色原理
brdu (5-脱氧尿核苷)是胸腺的衍生物,常用于标记中新合成的dna,可代替胸腺选择性整合到细胞中新合成的dna中(细胞周期s期)。这种掺入可以稳定存在,随着dna进入子细胞中brdu特---可以用于检测brdu的掺入,从而判断细胞的增殖能力。brdu特---可以用于检测brdu的掺入,从而判断细胞的增殖能力。
注射或细胞培养后利用抗brdu单,icc染色,显示增殖细胞。同时结合其它细胞标记物,双重染色,可判断增殖细胞的种类,增殖速度,对研究细胞动力学有重要意义。因组织细胞内无内源性brdu存在,所以brdu应用较广掺入双链dna内的brdu,以氢链与腺呤结合,不能直接与抗brdu反应,需经解链使brdu暴露方能被染色。常用的解链方法为---加热、蛋白酶处理等,使dna双链部分单链化,抗brdu小鼠单与增殖细胞核内的brdu结合,再经酶标抗小鼠igg孵育、
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