细胞生物学服务
南京英瀚斯生物科技公司自建有标准的细胞培养房，配备有生物安全柜、超净工作台、细胞三气培养箱、---细胞培养箱、荧光倒置显微镜、体视镜、、流式细胞仪等设备。细胞组---毕业于东南大学、华中科技大学等高校生物学相关，具有硕士研究生以上---，熟练掌握细胞学相关实验，细胞迁移检测操作，可开展多种细胞实验。
cell counting kit-8（简称cck-8）是一种基于wst-8的广泛应用于---和细胞毒性的检测试剂。wst-8化学名：2-(2-甲氧ji-4-硝ji---ji)-3-(4-硝ji---ji)-5-(2，4-二磺酸---)-2h-四唑单钠盐，是一种类似于mtt的化合物，它在电子载体1-甲氧ji-5-甲ji吩---鎓---二jia酯（1-methoxy pms）存在的情况下，被线粒体中的脱氢酶还原为具有高度水溶性的橙黄色甲瓒产物（formazan）。---越多越快，颜色越深；细胞毒性越大，则颜色越浅，对于同样的细胞，颜色的深浅与活xi胞的数量成正比，因此可利用这一特性直接进行---和毒性分析。
软琼脂培养克l隆形成试验基本步骤:
(1)取对数生长期细胞，用0.25%胰蛋白酶---并轻轻吹打，使之成为单细胞，作活l细胞计数，用含20%胎牛血l清的dmem培养液调整细胞密度至1x106细胞/l。然后根据实验要求作梯度倍数稀释。
(2)用蒸馏水分别制备出1.2%和0.7%两个浓度的低溶点琼脂糖液，高压灭菌后，维持在40日中不会凝固。
(3)按1:1比例使1.2%的琼脂糖和2xdmem培养基(含有2x和20%的小牛血l清)混合后，取3ml混合液注入直径6cm平皿中(10cm平皿加7~ 10ml)，冷却凝固，可作底层琼脂置co2温箱中备用。
(4)按1:1比例让0.7%的琼脂糖和2xdmem培养基在无菌试管中相混以后，再向管中加入0.2ml的细胞悬液，充分混匀，注入铺有1.2%琼脂糖底层平皿中，逐形成双琼脂层。待上层琼脂凝固后，置入37回5%co2温箱中培养10~14天。
(5)把平皿放置在倒置显微镜下，观察细胞数。计算形成率。软琼脂培养法常用检测肿l瘤细胞和转化细胞系。试验中琼脂与细胞相混时，琼脂温度不宜超过40日。接种细胞的密度每平方厘米不超过35个，一般6cm的平皿接种1000个细胞。正常细胞在悬浮状态下不能增殖，不适用于软琼脂克l隆形成试验。
软琼脂集落形成率实验(软琼脂克l隆)
将1.2%低熔点琼脂糖与2x细胞培养基以1:1的体积比混合制备0.6%的底层琼脂，6孔板中每个孔1.4ml温室凝固，取对数期细胞，胰酶---后吹散成单个细胞悬液，计数，并调细胞浓度为10000个/ml，将0.6%低熔点琼脂糖与2x细胞培养基以1:1的体积比混合，制备0.3%的上层琼脂，每孔加1ml 上层琼脂和100ul单细胞悬液(约1000ell/wel)， 混匀，室温凝固。置于37目，5%co2的细胞培养箱中培养2-3周，计数含50个细胞以上得克l隆，计算细胞集落形成率，spotll 采集图像。
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