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病理染色-天狼星红
天狼星红染色是显示胶原纤维分布的---染色方法,它是一种强酸性阴离子染料,与胶原纤维中碱性基团结合,故而显示胶原纤维的定位。
天狼星红染色可用作肝纤维化以及纤维化模型的定性与胶原纤维沉积的半定量分析。
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造模机制以15%---配制的60%---可以模拟高盐和---对胃的---作用,并在用前加热至55℃可模拟高温食物对胃的---作用;脱氧胆酸钠可以模拟十二指肠液(内含胆汁)反流对胃的---作用。
造模方法sprague dawley大鼠,雄性,平均体重170g。脱氧胆酸钠需每次灌胃前新鲜配制,终浓度为20mmol/l。灌胃用60%---是以15%---加无水---配制而成,灌胃前恒温至55℃。实验周期共13周。实验~35天,大鼠自由饮用脱氧胆酸钠溶液,同时每隔5天以60%---灌胃(10ml/kg)一次,第36~91天,每3天交替饮用脱氧胆酸钠或15%---,同时每隔7天以60%---灌胃一次。造模期间,配合使用饥饱失常法,即:~56天,饱食2天,禁食1天;第57~91天,饱食2天,禁食禁水1天。13周后,模型组大鼠体重比对照组明显下降,病理技术,胃黏膜厚度明显减小。大体病理可见胃黏膜皱襞变平甚至消失,黏膜血管暴露、黏膜呈颗粒或结节状,组织病理可见黏膜内炎性细胞---、腺体明显减少,排列不整,黏膜厚度明显减小。
透射电子显微镜(transmission electron microscope,tem)是使用zui为广泛的一类电镜。通过发射电子束从而穿过超薄的样品,同时与样本相互作用,既而形成图像。透射电镜具有分辨率高和放大倍数高的优点。其分辨率为0.1-0.2nm,切片,放大倍数为几万到几十万倍。目前透射电镜已经广泛的应用到癌zheng研究,---学研究,病理切片,微生物学,细胞学研究等生物领域。
透射电镜是以电子束透过样品经过---与放大后所产生的物像,投射到荧光屏上或照相底片上进行观察。电子与样品中的原子碰撞而改变方向,从而产生立体角散射。散射角的大小与样品的密度、厚度相关,因此可以形成明暗不同的影像。由于电子易散射或被物体吸收,故穿透力低,必须制备超薄切片(通常为50-100 nm)。要在机体si亡后的数分钟内取材,组织块要小(1mm3以内),常用戊er醛和锇suan双重固定,包埋介质包埋,用超薄切片机切成薄片,再经------和柠檬酸铅等进行电子染色。
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