关于细胞培养的常见问题
q:培养液到底要不要加双抗(青&链)?
a:双抗不是细胞生长必需的。我们培养细胞时不常规使用,因为连续使用会促进耐药性细胞株的产生,导致轻度污染持续存在。一旦将从培养液中去除,这种轻度污染终将发展成为---污染。具体情况,可根据自己实验室的环境,动物细胞培养,自行决定是否使用双抗。
q:细胞培养,能更换成其它种类的培养基吗?
a:我们---建议好使用细胞提供机构或细胞库的生长培养液。有些细胞可能会适应在不同培养基中生长,在做好保种的条件下,可以分出部分细胞做测试。
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---是指同一来源的细胞逐渐产生出形态结构、功能特征各不相同的细胞类群的过程,其结果是在空间上细胞产生差异,基因编辑技术,在时间上同一细胞与其从前的状态有所不同。---的本质是基因组在时间和空间上的选择性表达,通过不同基因表达的开启或关闭,终产生---蛋白质。细胞---是指将一群不同类型或者形态结构、功能特征存在差异的细胞通过生物学、物理学等手段,将之转变为具有相似/相同形态结构、功能特征的细胞群体的过程。
小鼠精原gan细胞分离富集和培养
成年小鼠gao丸中约有108个细胞,其中约有 2×104个是精原gan细胞,仅占gao丸生精上皮细胞总数的 0.02~0.03%,精原gan细胞数量太少不利于体外培养.分离和富集精原gan细胞成为精原gan细胞体外培养能否成功的前提条件.寻找分离和富集小鼠精原gan细胞有效方法. 方法:出生6-8天小鼠为实验对象,先用0.25%胰酶1mm edta---gao丸10min,浙江细胞,用胎牛xue清终止---,用一次40-um孔径的滤器过虑制成单 细胞悬液,30%percoll不连续密度梯度法离心富集精原gan细胞,再根椐未分化精原gan细胞表面thy1.2(cd90.2)阳性cd117(c- kit)阴性特点用流式细胞仪将精原gan细胞分选出来,并在体外进行培养尝试. 结果:30%percoll密度梯度离心前cd117(c-kit)阳性细胞占13.80±3.34%,cd90.2阳性细胞占28.98±4.51%,细胞实验外包, 二者都阳性细胞占8.98±2.98%,cd117阴性cd90.2阳性细胞占18.36±2.67%;离心后 cd117(c-kit)阳性细胞占12.37±3.34%,cd90.2阳性细胞占56.98±4.51%,二者都阳性细胞占 8.20±3.98%,cd117阴性cd90.2阳性细胞占32.36±3.67%;cd117(c-kit)阳性细胞和二者都阳性细胞所占百分比前后 比较差异无---性(p>;0.1),cd90.2阳性细胞和cd117阴性和cd90.2阳性细胞所占百分比前后比较差异有---性 (p<0.05);采用cd117和cd90.2作为标志分子,percoll离心后细胞悬液经facs分选后获得细胞纯度
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