细胞实验外包-湖州细胞实验-英瀚斯生物科技

透射电镜自噬小体检测

胰酶---，收集作用后的细胞，离心，先将细胞块固定在2.5%成二醛和0.1%的pbs溶液中保存在4c中过夜。

再用---梯度脱水，细胞实验外包费用，接下来用环氧树脂浸透并切成薄片。随后超薄切片用铜网固定，后用重金属---双氧---和柠檬酸铅染色。通过tem分析凋亡细胞内超微结构变化，拍照保存。

贴壁细胞:先倒出培养液，采用胰蛋白酶---或者用细胞刮(会产生碎屑)刮下:带培养液进行离心，100-1500/mim 5 10min。离心完毕倒出培养液。管底的细胞团不要打散， 沿管壁倒入适量(一般为材料体积的5-10倍)的2.5-3.5%成醒固定液，固定约1h-2h. 也可在4c冰箱过夜。

q:如何避免中沉淀物的出现？

a:首先要注意正确的解冻步骤，而且溶解过程中一定要每隔一段时间均匀而缓慢的摇动。我们已经发现在下列情况下沉淀物可能增加，细胞实验外包，使用中应该尽量避免：

（1）热灭活；

（2）在 37℃ 下培养；

（3）反复冻融；

（4）γ 射线照射；

（5）长期储存在 2-8℃；

（6）在室温下放置时间过长

q:如何去除中的沉淀？

a:如想去除这些絮状沉淀物，可以将分装到无菌离心管中，以  400g  离心，上清液即可直接加入到培养基 内一起过滤。

注意：不要以过滤的方式去除这些絮状沉淀物，因为这可能阻塞滤膜。