根据gb19489-2004实验室 生物 安全通用要求,四川医学实验,动物实验室的 生物 安全要点:
动物实验室的生物安全防护设施应参照bsl1-4实验室的要求,还应考虑对动物呼吸、排泄、毛发、抓咬、挣扎、逃逸、动物实验(如染毒、医学检查、取样、解剖、检验等)、动物饲养、动物及排泄物的处置等过程产生的潜在生物危害的防护。应---注意对动物源性气溶胶的防护,例如对动物的剖检应在负压剖检台上进行。
应根据动物的种类、身体大小、生活习性、实验目的等选择具适当防护水平的、于动物的、符合相关标准的 生物安全柜 、动物饲养设施、动物实验设施、消毒设施和清洗设施等。
实验室建筑应---实验动物不能逃逸,非实验室动物(如野鼠、昆虫等)不能进入。实验室设计(如空间、进出通道等)应符合所用动物的需要。
动物实验室空气不应循环。动物源气溶胶应经适当的过滤/消毒后排出,不能进入室内循环。
如动物需要饮用无菌水,供水系统应可安全消毒。
动物实验室内的温度、湿度、照度、噪声、洁净度等饲养环境应符合相关标准的要求。
实验动物的采集方法
1. 大鼠、小鼠的采集:用颈椎脱臼法处死动物,剥离出胸骨或股骨,用吸取少量的hank平衡盐溶液,冲洗出胸骨或股骨中全部液。如果是取少量的作检查,可将胸骨或股骨剪断,将其断面的挤在有稀释液的玻片上,混匀后涂片凉干即可染色检查。
2. 大动物的采集:狗等大动物的采集可采取穿刺方法。 先将动物、固定、局部除毛、消毒皮肤,医学实验外包,然后估计好皮肤到的距离,医学实验外包,把穿刺针的长度固定好。操作人员用左手把穿刺点周围的皮肤绷紧,右手将穿刺针在穿刺点垂直刺入,穿入固定后,轻轻左右旋转将穿刺针钻入,当穿刺针进入腔时常有落空感。狗的采集,一般采用髂骨穿刺。
狗等大动物常用的穿刺点:胸骨:穿刺部位是胸骨体与胸骨柄连接处。肋骨:穿刺部位是第5~7肋骨各点的中点。胫骨:穿刺部位是股骨内侧、靠下端的凹面处。如果穿刺采用的是肋骨,穿刺结束后要用胶布封贴穿刺孔,防止发生。
前lie腺素e2对大鼠巨噬细胞株nr8383 合成血管内皮生长因子促进人脐静脉血管内皮细胞成管、迁移的影响
方法:分别采用0.1 nmol/l pge2、1 nmol/l pge2、1 nmol/l pge2+10 nmol/l ep2受体抑zhi剂ah6809+10 nmol/l ep4受体抑zhi剂ah23848 处理的nr8383 细胞作为各实验组,选择未经pge2以及其特---受体抑zhi剂处理的nr8383 细胞作为对照组,医学实验外包公司,采用western blot 和qpcr方法检测各组nr8383细胞内vegf蛋白以及mrna的表达水平;收集以上各处理组的细胞培养上清液分别---1huvecs,运用transwell 小室、matrigel 胶细胞成管实验等实验方法,观察pge2调控巨噬细胞对huvec 迁移效应和成管能力的影响。
结果:随着nr8383 细胞培养液中加入pge2浓度增gao,其 vegf蛋白表达和vegf mrna的表达水平---升高(p<0.05);0.1 nmol/l、1 nmol/l pge2处理过的nr8383细胞培养上清液可以---增加huvec细胞形成的小管面积,形成小管面积随着pge2处理浓度的增加而增加(p<0.05);huvecs的迁移运动也随着pge2处理浓度的升高不同程度的增强,huvecs趋化的数量---升高(p<0.05);研究发现pge2特---的ep2/ep4 受体拮抗剂ah6809/ah23848,可以---抑制pge2 增强nr8383 细胞内vegf mrnas 表达的作用并且也---抑制pge2 增强 nr8383细胞促进huvecs成管和趋化能力的效应(p<0.05)。
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