透射电镜观察:可见凋亡细胞表面微绒毛消失,核染色质固缩、边.集,常呈新月形,核膜皱褶,胞质紧实,细胞器集中,胞膜起泡或出“芽”及凋亡小体和调亡小体被临近巨噬细胞吞噬现象。
结果评判:调亡细胞体积变小,细胞质浓缩。调亡i期( pro-apoptosis nuclei)的细胞核内染色---度盘绕,细胞实验,出现许多称为气穴现象( cavitati)的空泡结构; iia 期细胞核的染色---度凝聚、边缘化;细胞凋亡的晚期,细胞核裂解为碎块,产生调亡小体。
透射电镜自噬小体检测
胰酶---,收集作用后的细胞,离心,先将细胞块固定在2.5%成二醛和0.1%的pbs溶液中保存在4c中过夜。
再用---梯度脱水,细胞实验外包选,接下来用环氧树脂浸透并切成薄片。随后超薄切片用铜网固定,后用重金属---双氧---和柠檬酸铅染色。通过tem分析凋亡细胞内超微结构变化,拍照保存。
贴壁细胞:先倒出培养液,采用胰蛋白酶---或者用细胞刮(会产生碎屑)刮下:带培养液进行离心,100-1500/mim 5 10min。离心完毕倒出培养液。管底的细胞团不要打散, 沿管壁倒入适量(一般为材料体积的5-10倍)的2.5-3.5%成醒固定液,固定约1h-2h. 也可在4c冰箱过夜。
选择实验外包公司需要注意哪些事项?
1. 实地考察
可以到公司实地考察一下实验室,看一下实验室环境、设备仪器情况,细胞实验外包,是否能满足实验方案所需条件。能整体承接课题,动物细胞。一些大型仪器公司不一定有,看有没有高校平台资源渠道共享。---是真实进行实验的,这样后续实验结果数据也比较---。
2. 方案评估
实验合作前期一般会进行所需实验内容的评估,来确定终实际实验方案和报价。方案评估可以看出外包团队的性。一个---的外包公司会对方案提出针对性的建议,评估各项实验是否能做,以及根据预算情况和实际操作对细节适当地调整。任何实验都是有不确定性的,但是前期敲定好方案能为后续实际开展实验打下---基础,也会省去许多---和麻烦。
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