细胞实验介绍——细胞运动能力检测:
细胞划痕实验是体---拟细胞迁移能力和修复能力快捷的检测方法。在长满的细胞培养板或者培养皿中,细胞生物学,沿着中线使用移液器头或者其他硬物划1-3条平行的直线,去除中线的细胞,细胞周期,细胞在0h、12h、24h后,细胞培养技术,观察细胞往中线迁移情况,判断细胞迁移能力。
一般流程:细胞接种培养-划痕-不同时间点拍照
细胞迁移和侵袭实验是体---拟细胞迁移和侵袭能力的检测方法。使用不同孔径的聚---膜transwell小室放入培养板中,阿坝细胞,将细胞接种于小室中,利用培养液成分的差异---细胞运动,检测细胞的迁移和侵袭能力的差异。
一般流程:transwell小室准备-细胞接种-细胞培养-transwell小室染色-显微镜拍照
结果示例:
图 a 细胞划痕实验图;b,c 细胞迁移和侵袭实验图
细胞培养中常见的污染及解决方法
支原体污染
支原体是隐蔽的污染物,不能通过过滤去除。显微镜下没有任何可见的支原体污染迹象,比如细胞病变和浊度或 ph 值变化(即使在---污染的培养基中),这样就会导致我们产生错误的---。而在牛中,支原体是常见的微生物之一。
解决方法:通常的过滤灭菌方法对支原体没有影响。细胞一旦被支原体污染,---是对重要的细胞系,必须去除支原体,一般的方法有、抗和抗与补体联合。值得注意的是,支原体很---的结构特征是没有细胞壁。因此,它对作用于细胞壁的生物合成(如 β-内---类、万古等)完全不敏感,并且通常对多粘菌素、---和类具有耐药性。相反,四环素类和大环内酯类对支原体的抑制作用很强,而---糖苷类和氯的抑制作用较弱。
自噬流检测
自噬是调节真核细鹏生长、和能量代谢的重要生物学机制。细胞自噬行使其生物学功能的前提是自噬流的话化。大量证据表明自噬流受损与多种慢性炎性---,---是、神经退行性---及组织纤维化的发病密切相关,目前对于自噬液的检别是自噬与其相关---研究领域的---。由于自噬流是一个曲多个步骤组成的动态过程。因此往需要精细的突验才能准确判断自啦流状态。
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