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    2023-5-21

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灌注固定主要用于神经系统,其他组织意义不是很大,而且耗时耗力。对神经系统防止变性效果较好!

小鼠灌注

灌流固定小鼠时一般采用输液器的针头 (4 号半,这样肉眼可见就是肺部明显充气胀大变白,针头要从心轴方向进针,然后刺入心尖 3~4 毫米左右就可以了,开始灌流后剪破右心耳,约 40 毫升生理盐水,后再灌流约 20 毫升---,整个灌流固定的过程就完成了。


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三、实验指标区域指标开臂1停留时间、活动路程、进入次数、潜伏期、平均速度(x轴投影速度)开臂2停留时间、活动路程、进入次数、潜伏期、平均速度(x轴投影速度)开臂3停留时间、活动路程、进入次数、潜伏期、平均速度(x轴投影速度)其他臂停留时间、活动路程、进入次数、潜伏期、平均速度(x轴投影速度)四、实验方法及应用

1) 动物适应实验环境1周后,称重,禁食24小时。此后每天训练结束后---性地给予正常食料(据体重不同,大鼠16-20g,小鼠2-3g),以使体重保持在正常进食大鼠的80%~85%。

2) 第二天,迷宫各臂及中央区分撒着食物颗粒(每只4~5粒,动物实验外包,直径约3~4mm)。然后,同时将4只动物置于迷宫中央(通往各臂的门打开)。让其自由摄食、探究10min。

3) 第三天,动物模型实验,重复第二天的训练。这一过程让动物在没有很强的应激条件下熟悉迷宫环境。

4) 第四天起,动物单个进行训练:在每个臂靠近外端食盒处各放一颗食粒,让动物自由摄食。食粒吃完或10min后将动物取出。

5) 第五天,将食物放在食盒内,重复前---的训练,---2次。

6) 第六天以后,随机选4个臂,每个臂放一颗食粒;各臂门关闭,将动物放在迷宫中央;30s后,臂门打开,让动物在迷宫中自由活动并摄取食粒,直到动物吃完所有4个臂的食粒。如经10min食粒仍未吃完,则实验终止。每天训练两次,其间间隔1h以上。






6.  八臂迷宫实验方法根据实验目的的不同迷宫臂的数目可不同,包括8、16、24、32、40和48臂迷宫。迷宫臂越少要求动物记住探究过的臂也越小,动物的行为操作就越简单。增加臂的数目一方面增加了对动物空间记忆的要求,另一方面也引入了更多的、有---考虑的干扰因素(例如过去的迷宫学习对目前所测记忆的影响)。所以,通常使用8臂迷宫,既可减少不---的、过多臂的干扰,西安动物实验,又可缩短训练和测试所花的时间。

7.  所用食物通常为小块的、带巧克力味(动物喜欢的味道之一)或甜味的早餐圈(每块10mg);也可用液体食物(如巧克力奶或水)。后者对于测试某些影响动物对固体食物吞咽的尤为实用。

8.  影响动物迷宫操作主要有两大因素:对迷宫或观察者的恐惧与动物探究习性和已知放在迷宫臂内食物的驱使。恐惧因素过强会阻止动物的迷宫操作,使动物始终停留在迷宫的某一个地方而不去探究。缺乏对食物的渴求也会产生类似结果,增加对动物的抚摸,---时加高迷宫臂的侧墙,有助于减少动物的恐惧。如食物的驱使作用不足,可减少食物量,但必须同时监测体重和一般身体状况。通常大鼠体重不应低于禁食前的80%;对多数大鼠,体重降低15%即可。

9.  与水迷宫不同,臂迷宫适合反复测试或长期记忆的测试。一般认为,工作记忆代表短期记忆,参考记忆代表长期记忆。




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