阑尾炎动物模型
方法 成年大鼠,后固定,无菌条件下开腹,将阑尾及末端回肠和与阑尾系膜相连的肠段(下称临近肠段)移出腹腔并置壁上。剪开阑尾尖部的阑尾系膜,把阑尾尖部肠内容物挤至阑尾近端肠腔内,距尖部1cm处用1号丝线将阑尾管攀结扎。把结扎了的阑尾尖部摆放在回肠根部和临近肠段之间。用小圆针细丝线(000号)把回肠根部和临近肠段相应位置缝合一针(仅穿透浆肌层),后将结扎阑尾包埋于其下。再顺续沿末端回肠由远端至近端与临近肠段相应位置紧密缝合1~2针,将阑尾全部包埋在缝合的肠段之下。将外置的全部肠段送入腹腔,两层缝合关腹,无菌纱布包扎伤口,送回笼中饲养观察。或成年家兔,后固定于手术台架上,备皮消毒铺巾后,无菌条件下腹正中切口开腹6cm,寻及盲肠提出阑尾,于阑尾根部以4号丝线紧贴阑尾壁穿过系膜结扎阑尾,随后将阑尾纳回腹腔,逐层关腹。术后,在规定的时间点测定动物体温,行坏死阑尾炎腔内容物---培养,包囊或坏死阑尾大小的检测,以及肉眼病理观察和组织形态学改变的镜检。
特点 大鼠术后15d,阑尾呈脓性坏死,外裹一层纤维性包囊,囊内含有大量的---,模型成功率高。兔术后6~12h,阑尾充血、增粗、水肿;12~24h时,阑尾肿胀、增粗更为明显,外被脓苔与周围肠管粘连,部分阑尾壁可见斑点状出血灶,腹腔内有脓性渗液出现。与阑尾脓苔粘连的周围肠管亦呈明显的水肿、充血,甚或有阑尾系膜形成。腹腔渗液---培养有大肠生长。术后24h,兔体温可升至40℃左右。在整个造模过程中,模型动物神态萎靡,不食不饮,腹部胀满,2~4d内陆续。
前lie腺素e2对大鼠巨噬细胞株nr8383 合成血管内皮生长因子促进人脐静脉血管内皮细胞成管、迁移的影响
方法:分别采用0.1 nmol/l pge2、1 nmol/l pge2、1 nmol/l pge2+10 nmol/l ep2受体抑zhi剂ah6809+10 nmol/l ep4受体抑zhi剂ah23848 处理的nr8383 细胞作为各实验组,选择未经pge2以及其特---受体抑zhi剂处理的nr8383 细胞作为对照组,医学实验外包选,采用western blot 和qpcr方法检测各组nr8383细胞内vegf蛋白以及mrna的表达水平;收集以上各处理组的细胞培养上清液分别---1huvecs,运用transwell 小室、matrigel 胶细胞成管实验等实验方法,观察pge2调控巨噬细胞对huvec 迁移效应和成管能力的影响。
结果:随着nr8383 细胞培养液中加入pge2浓度增gao,其 vegf蛋白表达和vegf mrna的表达水平---升高(p<0.05);0.1 nmol/l、1 nmol/l pge2处理过的nr8383细胞培养上清液可以---增加huvec细胞形成的小管面积,形成小管面积随着pge2处理浓度的增加而增加(p<0.05);huvecs的迁移运动也随着pge2处理浓度的升高不同程度的增强,huvecs趋化的数量---升高(p<0.05);研究发现pge2特---的ep2/ep4 受体拮抗剂ah6809/ah23848,可以---抑制pge2 增强nr8383 细胞内vegf mrnas 表达的作用并且也---抑制pge2 增强 nr8383细胞促进huvecs成管和趋化能力的效应(p<0.05)。
实验动物的选择在此,提几点原则和方法。
第,江苏医学实验,做什么样的实验?什么动物适合本实验?做什么实验,这是选题时就确定好了的。肯定是经过论证的。无需多讲。用什么样的动物呢?我想,大多是参照文献,再结合自己对实验动物的了解。选题之时就肯定阅读过很多文献了,因此不会陌生。
如:做高、动脉粥样硬化,我想大多数人会选择大鼠、兔子,也可以选金黄地鼠、鹌鹑,医学实验外包,少数人会选小鼠,但我想用狗和猴的基本上不会有吧。因为要选择比较容易形成此---的动物,且要易得。
所以,对于不太熟悉的人来说,要多看文献,参考别人是如何选择的。就算是对动物比较了解,系统学过这方面知识的,也要多看文献,综合权衡。切忌随意地凭空想像。
第二,采取什么样的方法造模?做动物实验通常是要造模的。选择什么样的方式?这要从实验的目的及条件入手。造,可以用手术,也可以用。其中有四氧及链脲佐菌素(stz)。后者用得较多,且为国际认同。
而四氧目前用得较少了。造模方法一是参照<药理实验方法学>,二是参照文献。造模方法有时也决定了你的动物选择。像做手术造动脉粥样硬化,我想用大鼠比小鼠来得方便吧?
第三,经费承受能力如何?做实验也要精打细算。不可能为了所谓的高水平、技术而不顾实验室的条件。像做高脂动物模型,假设经费只有一万多元,一定要弄个敲除apoe基因的小鼠来做,恐怕没人认同。做一个简单的镇痛实验,你非得要用spf实验室,这也是不太实际的,也是没---的。
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