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    2023-5-25

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实验动物的采集方法


1. 大鼠、小鼠的采集:用颈椎脱臼法处死动物,剥离出胸骨或股骨,用吸取少量的hank平衡盐溶液,冲洗出胸骨或股骨中全部液。如果是取少量的作检查,可将胸骨或股骨剪断,将其断面的挤在有稀释液的玻片上,混匀后涂片凉干即可染色检查。

2. 大动物的采集:狗等大动物的采集可采取穿刺方法。 先将动物、固定、局部除毛、消毒皮肤,然后估计好皮肤到的距离,把穿刺针的长度固定好。操作人员用左手把穿刺点周围的皮肤绷紧,右手将穿刺针在穿刺点垂直刺入,实验外包,穿入固定后,轻轻左右旋转将穿刺针钻入,当穿刺针进入腔时常有落空感。狗的采集,一般采用髂骨穿刺。

狗等大动物常用的穿刺点:胸骨:穿刺部位是胸骨体与胸骨柄连接处。肋骨:穿刺部位是第5~7肋骨各点的中点。胫骨:穿刺部位是股骨内侧、靠下端的凹面处。如果穿刺采用的是肋骨,穿刺结束后要用胶布封贴穿刺孔,防止发生。







膀胱原位癌模型方法

分组及处理雌性c57bl/6小鼠150只,随机.分成a(膀胱粘膜未预处理组).b(膀胱粘膜预处理表浅模型观察组),c(膀胱粘膜预处理丝lie霉su治liao组)、d(膀胱粘膜预处理pbszhi疗对照组)和e(膀胱粘膜预处理不zhi疗生存期观察组)5组,每组30只。在灌注mb49膀胱ai细胞前,其中a组不进行预处理,b、c、d和e组则对膀胱粘膜进行预处理。在灌注mb49膀胱ai细胞后,a组不作任何处理;b组在灌注后第7天始每隔3d处死3只解剖观察膀胱肿liu生长情况及有无转移,并取qi官组织(膀胱、shen、输尿管.心、肝、肺、脾)做病理切片(he和免yi组化染色);c组在灌注后di1天开始给予si裂mei素(0.05 mg/ml)0.1 m膀胱灌注zhi疗,每隔3d1次,连续6次;d组灌注后di1天开始给予pbs膀胱灌注,实验外包,每隔3dl次,连续6次;e组不作处理。所有小鼠观察- - 般情况(精神状态、饮食、体等)zhong瘤生长情况(是否成瘤.肿liu大小.有无血尿、远处转移等)和生存期,并对si亡小鼠进行解剖,留取膀胱.shen、输尿管、心、肝、肺、脾等组织用4%福er马林固定(c.d组小鼠膀胱固定前称重)。灌注后第60天,处死a.c.d和e组未si亡小鼠,解剖并留取膀胱.shen、输尿管、心、肝、肺、脾等组织用4%福er马林固定,c、d.e组小鼠膀胱固定前称,实验外包选,









小鼠膀胱ai原位瘤动物模型建立方法


膀胱灌注法通常采用对数生长期的mb49小鼠膀胱ai细胞株作为实验材料,6-12周龄的雌性c57/bl6小鼠作为实验动物。- -般膀胱内灌注数量为:10^4-5*10^5个,实验外包公司,10^4-10^5个, .5x10^6-4x10^6个。实验中常通过导管对经过膜处理后膀胱灌入细胞悬液--定时间后使细胞粘附于膀胱壁上,建立起小鼠原位膀胱ai模型。该方法简便有效,成瘤率相对较高。但是在膀胱粘膜完整的情况下,发癌率- -般只有10%。为提高其移植成功率,研究者通常采用膀胱粘膜损伤技术进行膀胱灌注。常用的膀胱损伤技术有电灼法,酸性溶液和胰蛋白酶灌注法(17-19)。该方法成瘤率高,具有很强的实用性,但是膀胱ai模型插管要求高,肿liu细胞容易外渗,并且膜损伤处理过后易发生膀胱内发炎现象。





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