fish检测-延安pcr-英瀚斯

◆　hplc

如果合成的寡核苷酸应用于，定向诱变或定量的基因探测，那么对其纯度要求较高。脱盐或opc纯化的寡核苷酸可能达不到要求，则hplc纯化被广泛地用于这个目的。作为一种纯化树脂，阴离子交换树脂或反向树脂被用于寡核苷酸纯化。阴离子交换树脂的hplc通常显示95-98%纯化效率，对于达到35-mer寡核苷酸的纯化是充分的。反向树脂化的hplc与阴离子交换树脂的hplc呈现相似的纯化效率。因为hplc的纯化效率很大程度依靠寡核苷酸的长度，用hplc法不能有效纯化长的寡核苷酸（大于35-mer)。

◆　page

对于长的寡核苷酸的纯化（50-100mer），我们page纯化法，它使用交连的聚---凝胶(电泳)作为纯化基质。尽管page显示出高的纯化效率（＞98%），但它在额外的步骤方面有一些缺陷，比如在page之后需要提取和脱盐，继而将导致纯化产率的下降。

单细胞rna测序

单细胞rna测序也称scrna-seq。通常而言，实时荧光定量pcr，一般的组织细胞rna-seq实验会产生1000万个读数，延安pcr，如果一个基因的频率超过50rpkm，---多少钱，即每百万读数中每千个碱基中超过50个，这一基因即被认为有表达。泊松分布下，1kb长的基因有超过500个读数和4%的小变异系数，fish检测，即cv值；哺乳动物细胞通产含有200，000个mrna，因此至少要用50个单细胞一起才能到达小cv值；考虑到逆转录的效率和环境干扰等因素，为得到准确的表达和细胞种类的识别，需要使用的细胞数量实际要更多。