sirna 的作用原理
利用短寡核苷酸 sirna 或能够转录 sirna 的 dna 质粒将双链 rna (dsrna) 引入细胞。细胞中的 dicer 蛋白将 dsrna ---为 21 bp 的 dsrna (sirna)。 sirna 被整合到 rna ---沉默复合体 (risc) 中。在 risc 复合体中,dsrna 发生链分离。其反义链与细胞中的互补/靶 mrna 杂交。活化 risc 中的---酶降解靶 mrna。断裂的 mrna 无法翻译成蛋白质。也就是说蛋白质无法表达,从而成功“敲除”蛋白质。
6. 八臂迷宫实验方法根据实验目的的不同迷宫臂的数目可不同,包括8、16、24、32、40和48臂迷宫。迷宫臂越少要求动物记住探究过的臂也越小,陕西动物模型,动物的行为操作就越简单。增加臂的数目一方面增加了对动物空间记忆的要求,另一方面也引入了更多的、有---考虑的干扰因素(例如过去的迷宫学习对目前所测记忆的影响)。所以,通常使用8臂迷宫,动物模型制作公司,既可减少不---的、过多臂的干扰,又可缩短训练和测试所花的时间。
7. 所用食物通常为小块的、带巧克力味(动物喜欢的味道之一)或甜味的早餐圈(每块10mg);也可用液体食物(如巧克力奶或水)。后者对于测试某些影响动物对固体食物吞咽的尤为实用。
8. 影响动物迷宫操作主要有两大因素:对迷宫或观察者的恐惧与动物探究习性和已知放在迷宫臂内食物的驱使。恐惧因素过强会阻止动物的迷宫操作,使动物始终停留在迷宫的某一个地方而不去探究。缺乏对食物的渴求也会产生类似结果,增加对动物的抚摸,---时加高迷宫臂的侧墙,有助于减少动物的恐惧。如食物的驱使作用不足,可减少食物量,但必须同时监测体重和一般身体状况。通常大鼠体重不应低于禁食前的80%;对多数大鼠,体重降低15%即可。
9. 与水迷宫不同,臂迷宫适合反复测试或长期记忆的测试。一般认为,动物模型实验公司,工作记忆代表短期记忆,参考记忆代表长期记忆。
五、注意事项
1. 小宫设备和实验程序与大鼠类似,但迷宫规格应比大宫小,以免增加小鼠行为操作难度。
2. 本实验也可只用来测定工作记忆。方法中不同的是,在所有臂均放置食粒,而不是只选4个臂放置食粒。
3. 慢性应激对动物的迷宫操作可产生影响,基因敲除小鼠,且存在性别差异。经过慢性应激以后,雄性大鼠---减弱,表现为记忆错误频率增加;雄性大鼠的空间记忆反而增强,表现为错误频率减少。
4. 即使在---进食条件下,也应让大鼠体重每周增加5g,以免动物因营养---而患病。剔除身体状态---的动物。
5. 迷宫周围的任何一件物品均可被动物用来作为空间定为的标志。去除或移动这些标志可能使动物操作困难并降低迷宫臂选择的准确性。
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