pcr-南京英瀚斯生物科技-pcr

3.引物的od数如何定量？

答：引物合成引物od数是这样测定的：用紫外分光光度计，波长260nm，石英比色杯，光程为1厘米，测定溶液的光密度。测定时溶液的光密度好稀释到0.2-1.0之间。dna干粉用一定体积的水充分振荡溶解以后，pcr检测，用1ml水稀释测od值。需要根据稀释倍数换算出母液的od值。

4.需要什么级别的引物？

答：引物常用的纯化方式脱盐、biorp / opc纯化、page纯化、hplc纯化。根据实验需要，确定订购引物的纯度级别。

通常活性氧阳性对照在---细胞20-30分钟后可以---提高活性氧水平。

收集细胞后装载探针：按照1：1000用无培养液稀释dcfh-da，使终浓度为10微摩尔/升。细胞收集后悬浮于稀释好的dcfh-da中，细胞浓度为一百万至二千万/毫升，37℃细胞培养箱内孵育20分钟。每隔3-5分钟颠倒混匀一下，使探针和细胞充分接触。用无细胞培养液洗涤细胞三次，以充分去除未进入细胞内的dcfh-da。直接用活性氧阳性对照及自己感兴趣的---细胞，或把细胞等分成若干份后---细胞。通常活性氧阳性对照在---细胞20-30分钟后可以---提高活性氧水平。

2.、检测

对于原位装载探针的样品可以用激光共---显微镜直接观察，或收集细胞后用荧光分光光度计、荧光或流式细胞仪检测。

对于收集细胞后装载探针的样品可以用荧光分光光度计、荧光或流式细胞仪检测，用激光共---显微镜直接观察也可以。