实时荧光定量pcr-英瀚斯-贵州pcr

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    2023-8-22

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活性氧检测试剂盒(reactive oxygen species assay kit)是一种利用荧光探针dcfh-da进行活性氧检测的试剂盒。dcfh-da本身没有荧光,可以自由穿过细胞膜,进入细胞内后,实时荧光定量pcr,可以被细胞内的酯酶水解生成dcfh。而dcfh不能通透细胞膜,从而使探针很容易被装载到细胞内。细胞内的活性氧可以氧化无荧光的dcfh生成有荧光的dcf。检测dcf的荧光就可以知道细胞内活性氧的水平。 本试剂盒提供了活性氧阳性对照试剂rosup以便于活性氧的检测。rosup是一种混合物(compound mixture),浓度为50mg/ml。

一、注意事项

1、探针装载后,一定要洗净残余的未进入细胞内的探针,否则会导致背景较高。

2、探针装载完毕并洗净残余探针后,可以进行激发波长的扫描和发射波长的扫描,以确认探针的装载情况是否---。

3、尽量缩短探针装载后到测定所用的时间(---时间除外),以减少各种可能的误差。

4、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴---手套操作。




蛋白质定量组学服务

细胞内蛋白质组丰度的动态变化对不同生命过程有重要影响。例如在许多---的发生和发展进程中,常常伴随着某些蛋白质的表达异常。目前定量蛋白质组学技术主要分为标记(label)策略和非标记的(label free)定量策略,pcr引物设计,其中标记策略又分为体内标记(如 silac、15n 标记),以及体外标记(如 itraq、tmt 标记) 。

传统的基于2d双向凝胶电泳分离的蛋白质组通常可以鉴定出约1000种蛋白,对全蛋白质组的覆盖仅在5~10%左右,不能满足高通量定量蛋白质表达谱分析的要求。我们结合样品制备与高分辨率、高灵敏度的液相色谱-质谱联用技术,可在细胞与组织类样品中鉴定直至多于10000个蛋白,对全蛋白质组的覆盖>;60%。结合生物信息学分析,为您构建高通量蛋白质定量表达谱。








二、操作步骤:

1. 所有在纯化系统里使用的溶液当日都需要经过 0.22μm 的滤膜抽滤、脱气处理;保存 4℃ 冰箱里的缓冲液若要在室温使用需恢复至室温后抽滤脱气;

2. 样品上柱纯化前,需先滤膜过滤,少量样品可用离心(13000rpm,10min);

3. 依次用水、缓冲液洗泵;设置流速和柱前警报压(压力值参阅层析柱及填料说明书,取较小的一个大耐受压力)。防止柱中进入气泡,影响分离效果;

4. 当柱子限压在 0.3mpa,贵州pcr,或者在限压状态---速很低时,ph valve 中的 restirtor 可以切换成 off line,即显示 by-pass 状态;

5. 当需要通过仪器上样环上样时,将 w1 阀口处换成带透明短软管的阀门,荧光定量pcr,从此处阀门位通过倒吸样品上样;

6. 进样阀「inject」为上样状态。上样结束可将进样阀切换回「load」状态。并用纯水认真清洗上样环至少 3 次;将 w1 阀口处换回原来接头阀门。

7. 纯化结束后,用纯水清洗泵和平衡柱子;再用 20% 的---清洗泵以及系统。长期不用,层析柱应保存在 20% 的---中,泵放置在 20% ---中;

8. 实验结束后及时倾倒废液瓶里的废液;





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