




------对大鼠视神经损伤的影响
方法: sd大鼠67只,随机取20只为正常组,医学实验外包选,不予任何处理。余行视神经钳夹法造模,造模成功42只纳入实验。随机分为:模型对照组和---组,各21只/组。造模后4 d,以tunel法检测大鼠视网mo和视神经细胞凋亡,造模后7 d,rt-pcr、western-blot检测视wang膜和视神经节细胞组织caspase-3、bcl-2基因和蛋白表达。造模后14 d,行闪光视觉诱发电位检测,处死大鼠取眼球,观察各组大鼠视wang膜和视神经的病理形态,行视wang膜神经节细胞计数。
实验动物的给法
(一)注she给药法
1. 皮射 注she时用左手拇指及食指轻轻捏起皮肤,右手持将针头刺入,固定后即可进行注射。一般小鼠在背部或前肢腋下,大鼠在背部或侧下腹部;---在后大腿内侧、背部等脂肪少的部位;兔在背部或耳根部注she;蛙可在脊背部淋巴囊注射;狗多在大腿外侧注she,拔针时,轻按片刻,防药液逸出。
2. 皮内注she 此法用于观察皮肤血管的通透性变化或观察皮内反应。 如将一定量的性同位素溶液、颜料或致炎物质、等注入皮内,观察其消失速度和局部---循环变化,作为皮肤血管通透性观察指标之一。方法是:将动物注射部位的毛剪去,消毒后,用皮试针头紧贴皮肤皮层刺入皮内,然后使针头向上挑起并再稍刺入,即可注射药液。注射后可见皮肤表面鼓起一白色小皮丘。
3. 肌肉注she 当给动物注she不溶于水而混悬于油或其他溶剂中的时,常采用肌肉注she。肌肉注she一般选用肌肉发达、无大血管经过的部位,多选臀部。
注she时针头要垂直快速刺入肌肉,如无---现象即可注she。给大、小鼠作肌肉注she时,选大腿外侧肌肉进行注she。
4. 腹腔注she 先将动物固定,腹部用酒精棉球擦试消毒,然后在左或右侧腹部将针头刺入皮下,沿皮下向前推进约0.5厘米,再使针头与皮肤呈45 度角方向穿过腹肌刺入腹腔,此时有落空感,回抽无肠液、尿液后,缓缓推入药液。此法大小鼠用的较多。
5. 静脉注she 是将药液直接注she于静脉管内,使其随着---分布全身,迅速奏效。但排泄较快,作用时间较短。
小鼠、大鼠的静脉注she:常采用尾静脉注she。鼠尾静脉共有3根, 左右两侧和背侧各1根,两侧尾静脉比较容易固定,故常被采用。操作时,先将动物固定在暴露尾部的固定器内(可用烧杯、铁丝罩或粗试管等物代替),用75%酒精棉球反复擦试使血管扩张, 并可使表皮角质软化,医学实验外包公司,以左手拇指和食指捏住鼠尾两侧,医学实验外包,使静脉充盈,医学实验,注she时针头尽量采取与尾部平行的角度进针。

前lie腺素e2对大鼠巨噬细胞株nr8383 合成血管内皮生长因子促进人脐静脉血管内皮细胞成管、迁移的影响
方法:分别采用0.1 nmol/l pge2、1 nmol/l pge2、1 nmol/l pge2+10 nmol/l ep2受体抑zhi剂ah6809+10 nmol/l ep4受体抑zhi剂ah23848 处理的nr8383 细胞作为各实验组,选择未经pge2以及其特---受体抑zhi剂处理的nr8383 细胞作为对照组,采用western blot 和qpcr方法检测各组nr8383细胞内vegf蛋白以及mrna的表达水平;收集以上各处理组的细胞培养上清液分别---1huvecs,运用transwell 小室、matrigel 胶细胞成管实验等实验方法,观察pge2调控巨噬细胞对huvec 迁移效应和成管能力的影响。
结果:随着nr8383 细胞培养液中加入pge2浓度增gao,其 vegf蛋白表达和vegf mrna的表达水平---升高(p<0.05);0.1 nmol/l、1 nmol/l pge2处理过的nr8383细胞培养上清液可以---增加huvec细胞形成的小管面积,形成小管面积随着pge2处理浓度的增加而增加(p<0.05);huvecs的迁移运动也随着pge2处理浓度的升高不同程度的增强,huvecs趋化的数量---升高(p<0.05);研究发现pge2特---的ep2/ep4 受体拮抗剂ah6809/ah23848,可以---抑制pge2 增强nr8383 细胞内vegf mrnas 表达的作用并且也---抑制pge2 增强 nr8383细胞促进huvecs成管和趋化能力的效应(p<0.05)。
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