动物实验室-陕西动物实验-英瀚斯生物科技

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    2023-9-4

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动物膀guang炎模型构建方法

膀guang炎:

 大部分情况下,膀guang炎由---感ran所致,膀胱感ran可能引起疼痛并令人烦恼。如果感ran扩散至shen脏,可能发展为---的健康问题。

 膀guang炎还可能作为对某些yao物或放she---的反应出现。某些因素有时会---膀胱,例如卫生产品、sha精凝胶或长期使用导管,这也可能引发膀guang炎。膀guang炎还可能作为另一种---的并fa症出现。

实验材料

c57bl/6小鼠

1-2x108cfu/ml大肠杆jun悬液

24g留置针

注she器

10%水合氯醛

方法步骤

1、小鼠称量体重后按照重量使用10%水合氯醛进行ma醉。

2、ma醉后的小鼠用胶布固定于板上

3、触摸小鼠下腹部,摸到鼓包时确定小鼠膀胱所在位置,轻柔按压膀胱,排空尿液。

4、使用碘酊消毒niao道口,使用合适的留置针润滑后从niao道外口插入膀胱。

5、成功后缓慢注入50微升大肠gan菌悬液,留置针可保留至小鼠su醒前,防止漏液6、注射完成后,小鼠放回笼中,等待自然su醒,正常饲养。

实验案例


给药24小时后,形态学可见大量炎性细胞浸润

组织水肿,膀胱上皮脱落。


mdc检测方法

一、主要试剂材料

细胞自噬染色检测试剂盒(mdc法)(solarbio,g0170)

dmem(hyclone,sh30023)

fbs(hyclone,sh30070.03)

青链mei素(hyclone,sv30010)

胰酶(hyclone,陕西动物实验,sh30042.01)

pbs(南京生兴,sn331)

co2培养箱(thermo fisher,3131)

confocal荧光显微镜(zeiss,动物实验室,lsm710)

二、实验方案

1、mg63及其耐药株培养在含10%胎牛xue清的dmem完全培养基中培养,培养在37℃含5%co2的细胞培养箱中培养,当---至80%-90%时,用胰酶将细胞---下来,按照1:3比例传代。

2、将1×106个细胞种在3.5cm玻璃底培养皿中,将细胞放入培养箱中培养过夜后,分别加入mir-22、cisp1atin、cisp1atin和mir-22后,将细胞放入培养箱中培养12h、24h。3、将细胞从培养箱中取出,去除培养基,用300~400μl的1×wash buffer清洗细胞1次,弃上清。4、加入适量mdc stain,轻轻混匀。5、室温避光染色15~45min。6、用300~400μl的1×wash buffer清洗细胞2次,---前动物实验,弃上清。7、加入100μl的collection buffer重悬细胞,动物实验外包,滴加于载玻片上并加盖玻片。8、荧光显微镜下观察(激发滤光片波长355nm,阻断滤光片波长512nm),拍照。


5. 剥夺杆睡眠剥夺法

在标准实验室笼中采用间隙性的剥夺杆扫描进行触觉---来干扰自由行为的小鼠。该方法防止了人类接触和---对睡眠剥夺的影响,并且在整个睡眠剥夺过程期间小化身体活动。此外,该程序准确且可预测。实验室动物从小都是在饲养笼中长大,基于实验室饲养笼使得动物能够保持在正常的社会环境中实施了一种相对---的方法来---动物睡眠剥夺模型,从而避免了外界环境及其他因素对睡眠剥夺的影响。此外,基于饲养笼式的睡眠剥夺仪易于组装和清洗,设计地人性化。






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