实时荧光定量pcr-陕西pcr-南京英瀚斯

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    2023-10-1

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20.primer设计的基本原则是什么?

答:引物设计的下列原则供您参考。

◆引物长度一般在18-35mer。

◆g-c含量控制在40-60%左右。

◆避免近3端有酶切位点或发夹结构。

◆如果可能避免在3端5个碱基有2个以上的g或c。

◆如果可能避免在3端1个碱基为a。

◆避免连续相同碱基的出现,---是要避免gggg或更多g出现。

◆退火温度tm控制在 58-60c 左右。

◆如果是设计点突变引物,突变点应尽可能在引物的中间。

21.为什么引物的od260/od280小于1.5 ?

答:引物应该全是dna,但是od260/od280的比值为什么那么低,怎么会有蛋白质污染?引物化学合成,哪里有机会污染到蛋白质?需要---的是od260/od280的比值不能用来衡量引物的纯度。od260/od280的比值过低一般是由于引物中c/t 的含量比较高所致。下表是一个20mer 同聚体引物的od260/od280的比值,清楚表明od260/od280的比值与引物的碱基组成密切相关。






高l效液相色谱法检验方法


高l效液相色谱法是一种现代液体色谱法,其基本方法是将具一定极性的单一溶剂或不同比例的混合溶液作为流动相,用高压输液泵将流动相注入装有填充剂的色谱柱,注入的供试品被流动相带入柱内进行分离后,各成分先后进入检测器,用记录仪或数据处理装置记录色谱图或进行数据处理,得到测定结果。由于应用各种性质的微粒填料和加压的液体流动相,本法具有分离---,分析速度快的特点。


高l效液相色谱法适用于能在特定填充剂的色谱柱上进行分离的---的分析测定,陕西pcr,---是多组分---的测定、杂质检查和大分子物质的测定。有的---需要在色谱分离前或后经过衍生化反.应,方能进行分离或检测。常用的色谱柱填充剂有硅胶用于正相色谱;化学键合固定相,---,根据键合的基团不同可用于反相或正相色谱,其中常用的是十八烷基硅l烷(又称ods)键合硅胶,可用于反相色谱或离子对色谱离子交换填料,用于离子交换色谱,是有一定孔径的大孔填料,用于排阻色谱。











蛋白质定量组学服务

细胞内蛋白质组丰度的动态变化对不同生命过程有重要影响。例如在许多---的发生和发展进程中,常常伴随着某些蛋白质的表达异常。目前定量蛋白质组学技术主要分为标记(label)策略和非标记的(label free)定量策略,其中标记策略又分为体内标记(如 silac、15n 标记),以及体外标记(如 itraq、tmt 标记) 。

传统的基于2d双向凝胶电泳分离的蛋白质组通常可以鉴定出约1000种蛋白,对全蛋白质组的覆盖仅在5~10%左右,不能满足高通量定量蛋白质表达谱分析的要求。我们结合样品制备与高分辨率、高灵敏度的液相色谱-质谱联用技术,实时荧光定量pcr,可在细胞与组织类样品中鉴定直至多于10000个蛋白,对全蛋白质组的覆盖>;60%。结合生物信息学分析,为您构建高通量蛋白质定量表达谱。








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