睡眠剥夺模型
实验用金属箱直径35 cm, 每箱装1只大鼠。remsd 各组分别置于直径为6.5 cm的小站台上,医学实验外包,对照组大鼠置于直径15 cm的大站台上,周围是水环境,水深3 cm,平台在水面以上1 cm,于平台以上14 cm 处放笼罩,医学实验外包费用,上面放水和食物。水温和室温保持在25 c,每日换水并打扫实验箱。remsd 组大鼠在小台上屈曲而立,在快动眼睡眠(rapid eye movement sleep, rems) 时,由于伴随全身肌肉松弛和节律性垂头,大鼠落入水中而惊醒,医学实验,再爬上站台。用此方法自18:00开始连续剥夺大鼠的rems至相应实验时间点。
旷场实验( open field test, oft )
实验装置为高60 cm、 底面边长100 cm、内壁涂黑的无盖方箱,底面平均分为25个小方格,正上方2 m处架一---机,镜头对准箱底,实验在安静环境下进行,大鼠置于方箱底面中心,同时进行---和计时,3 min 后停止---,更换动物后,继续进行实验。2次实验之间清洗箱壁及底面,以免上次动物余留的信息影响下次实验结果。计分方法:通过放像设备,观察大鼠3 min内越过的格子数为水平得分,后肢站立次数为垂直得分,两者之和为oft总得分。remsd实验前后均进行旷场实验。
人卵l巢癌课鼠皮下移植瘤模型
造模方法
实验动物常用balb/c-nu/nu裸鼠,4~6周龄,雌性。移植材料常用人卵l巢癌细胞株skov3、ovcar3。常规培养人卵l巢l癌肿l瘤细胞株,收集处于对数生长期细胞,制成单细胞悬液。调整细胞浓度为5.0×10000000ml。用1ml注l射器将细胞悬液注入裸鼠肩胛背部等部位皮下,0.2ml/只。接种后每天观察肿l瘤生长情况。
实验动物各种---、的采集方法
---液的采集
(一) 唾液
1. 直接抽取法 在---实验中, 可用吸管直接插入动物口腔或唾液腺导管抽吸唾液,此法非常简单,但从口腔抽吸唾液会有杂质混入。
2. 制造腮腺瘘法 在慢性实验中,收集狗的唾液,要用手术方法将腮腺导管开口移向体外,即以腮腺导管为中心,切成一直径约2~3cm的圆形粘膜片,将此粘膜片,与周围组织分开,穿过皮肤切口引到颊外,将带有导管开口的粘膜片与周围的皮肤缝合,腮腺分泌的唾液就流出颊外。这种方法可以收集到较纯净的唾液。
(二)胃液
1. 直接收集胃液法 ---实验时,先将动物,将插胃管经口插入胃内,在灌胃管的出口连一,用此可收集到胃液,医学实验外包选,此法适用于狗等大型动物。如是大鼠,需手术剖腹,从幽门端向胃内插入一塑料管,再由口腔经食道将一塑料管插入前胃,用ph7.5、35℃左右的生理盐水,以12ml/h的流速灌胃,收集流出液,进行分析。
2. 制备胃瘘法 在慢性实验中,收集胃液多用胃瘘法,如全胃瘘法、巴氏小胃瘘法、海氏小胃瘘法等。制备小胃是将动物的胃分离出一小部分,缝合起来形成小胃,主胃与小胃互不相通,主胃进行正常---,从小胃可收集到纯净的胃液。应用该法,可以待动物恢复健康后,在动物清醒状态下反复采集胃液。
(三)胰液和胆汁
在动物实验中,主要是通过对胰总管和胆总管的插管而获得胰液或胆汁。狗的胰总管开口于十二指肠降部,在紧靠肠壁处切开胰管,结扎固定并与导管相连,即可见无色的胰液流入导管。大鼠的胰管与胆管汇集于一个总管,在其入肠处插管固定,并在近肝门处结扎和另行插管,可分别收集到胰液和胆汁。
有时也可通过制备胰瘘和胆囊瘘来获得胰液和胆汁。
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