透射电子显微镜(transmission electron microscope,tem)是使用zui为广泛的一类电镜。通过发射电子束从而穿过超薄的样品,同时与样本相互作用,既而形成图像。透射电镜具有分辨率高和放大倍数高的优点。其分辨率为0.1-0.2nm,放大倍数为几万到几十万倍。目前透射电镜已经广泛的应用到癌zheng研究,---学研究,微生物学,细胞学研究等生物领域。
透射电镜是以电子束透过样品经过---与放大后所产生的物像,投射到荧光屏上或照相底片上进行观察。电子与样品中的原子碰撞而改变方向,从而产生立体角散射。散射角的大小与样品的密度、厚度相关,因此可以形成明暗不同的影像。由于电子易散射或被物体吸收,故穿透力低,必须制备超薄切片(通常为50-100 nm)。要在机体si亡后的数分钟内取材,组织块要小(1mm3以内),常用戊er醛和锇suan双重固定,包埋介质包埋,用超薄切片机切成薄片,再经------和柠檬酸铅等进行电子染色。
mian疫组化检测
各组小鼠shen脏α-sma表达差异
mian疫组化技术是一种综合定性、定位和定量;形态、机能和代谢密切结合为一体的研究和检测技术。在原位检测出病原的同时,还能观察到组织病变与该病原的关系,确认受染细胞类型,从而有助于了解---的发病机理和病理过程。
mian疫酶组化技术是通过共价键将酶连接在抗ti上,制成酶标抗ti,再借酶对底物的特异催化作用,生成有色的不溶性产物或具有一定电子密度的颗粒,于普通显微镜或电镜下进行细胞表面及细胞内各种抗原成分的定位,根据酶标记的部位可将其分为直接法(一步法)、间接法(二步法)、桥联法(多步法)等,用于标记的抗ti可以是用mian疫动物制备的多ke隆或特---单ke隆抗ti,zui好是特---强的高xiao价的单ke隆抗ti。直接法是将酶直接标记在第yi抗ti上,病理实验,间接法是将酶标记在第二抗ti上,检测组织细胞内的特定抗原物质。目前通常选用mian疫酶组化间接染色法。
面对着色深浅不一的组化切片用肉眼观察的结果只能是定性的,不准确的。使用image-pro-plus图像分析软件对切片拍摄的照片比较累积光密度(iod)值比肉眼观测更jing确。通过比较实验各组iod值,我们可以为您提供半定量的数据分析。
病理实验外包,病理染色骨组织的处理方式:组织里存有钙盐可妨碍用常规方法制作---切片。骨组织及钙化---,经过固定后,需要先将钙盐除去使组织软化,才能进行常规切片。如果脱钙不全,则切片容易撕开或碎裂,损伤切片刀刀刃。脱去钙盐的过程,称为脱钙。骨组织固定24小时后,锯下不超过0.5cm厚的薄骨片,病理实验外包收费,以4%---固定后,进行脱钙。骨组织过厚则需延长脱钙时间,组织病理学实验外包,但长时间浸于强酸会影响切片染色效果。
取材骨组织固定于10%---24小时后再锯取厚度约0.5cm骨片
固定
以10%---固定2天
脱钙
将组织置于脱钙剂中,病理实验外包,每日更换新鲜液,直至组织软化为止
除酸
流水冲洗24小时
脱水、浸蜡、切片
进行常规脱水、透明、浸蜡、切片 南京英瀚斯,病理染色实验服务平台。
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