大鼠脑缺血-再灌注模型实验原理
大脑中动脉(mca)为---上发生脑缺血损伤zui常见的部位之一。故大脑中动脉阻塞(mcao)模型被广泛用于局灶性脑缺血的研究。用血管内线栓阻断法制备大鼠 mcao模型。已被脑血管病研究者广泛接受和采用。
是研究局灶性脑缺血zui常用的造模方法。该方法利用尼龙线栓从一侧颈总动脉或颈外动脉阻断mca供血造成局灶性脑缺血,缺血一定时间后回撤线栓,缺血区可通过脑底动脉环由对侧的颈内动脉、椎基底动脉和脑动脉皮质支的侧支循环实现再灌注。
目前实验室较多采用mca阻断120min、0min及90min的短暂脑缺血-再灌注模型。
实验材料与方法
(一)实验材料
1.实验动物 sd雄性大鼠,体重250~300g,清洁级。
2.所需手术材料 器械盘,大鼠脑缺血再灌注模型,3.6%水合氯醛,---5ml注射qi,尼龙鱼线(直径0.26mm,日本产,按要求制好备用),备皮剪、小杂物盘、眼ke直剪,眼ke弯剪,眼ke直镊,眼ke弯镊,止血钳,持针器,玻璃分针,手术缝针,0号手术线,无菌棉签,碘伏,生理盐水等。
神经功能评价和行为学评价主要用于反映脑缺血再灌注模型动物的神经行为表现和损伤程度,常用的方法有longa评分法、bederson评分法、zealander梯形迷宫法、morris水迷宫法等。脑血流测量主要用于监测动物的脑血流变化和再灌注效果,常用的方法有激光多普勒血流仪、核ci共振灌注成像等。脑组织染色主要用于观察动物的脑组织结构和病理变化,常用的方法有ttc染色、he染色、nissl染色等。生化指标检测主要用于测定动物的---或脑组织中的一些相关物质的含量和活性,如乳酸脱氢酶、超氧化物歧化酶、---醛等 。分子生物学检测主要用于分析动物的基因表达和蛋白质水平的变化,如rt-pcr、western blot、免yi组化等。
脑缺血再灌注模型的建立需要遵循一定的步骤和注意事项。首先,需要选择合适的动物品系、性别、年龄和体重,一般以sd大鼠或c57bl/6小鼠为常用动物,雌性或雄性均可,成年或亚成年均可,体重在220-270 g或20-25 g之间为宜。其次,需要在无菌的条件下进行手术操作,对造模动物进行ma醉、固定、剃毛、消毒等准备工作,然后沿颈部中线切开皮肤和肌肉,暴露颈总动脉(cca)、颈外动脉(eca)和颈内动脉(ica),并分别结扎或夹闭动物模型的相应的血管。
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