细胞培养中常见的生物污染包括---污染、霉菌污染、支原体污染、黑点污染、---污染和原生动物污染。这些污染在细胞培养中的特点及相应的解决办法如下：
1.---污染
---在普通倒置显微镜下呈黑色和细砂状。根据gan染菌的种类不同，可能会呈现不同的形状，培养液一般会变得浑浊、黄色，对细胞生长有明显影响。
解决方法：仔细检查器具的灭菌情况，---通风时间和高压灭菌器的压力是否足够。重要的是，与培养基接触的移液管等物品如果被污染两次，则可能会导致储存溶液也受到污染。所以一定要注意！下次使用前要检查培养基的浑浊度。此外，建议在培养基中添加抗生su。
q:中可能出现的沉淀物是什么？
a:基于多年的实验研究，用于细胞培养的胎牛以及其它中可能会存在以下种类的沉淀物：
（1）纤维蛋白，它是经常出现的较大的沉淀物，可以达到 1-2mm，可以用肉眼观察到。因为都是在低温下进行收集和快速处理的，一些纤维蛋白原（可溶性的形成絮状纤维蛋白的前体）在处理过程中仍然处于溶解状态，当经过的过滤分装后，就会在瓶中凝结出现纤维蛋白沉淀。
（2）磷酸钙，它也是常见的一种沉淀物，通常会使出现浑浊，并且在 37℃ 培养的时候会增加。这种沉淀物在倒置显微镜下观察像小黑点，细胞实验外包， 这些小黑点由于布朗运动看上去可以活动，因此经常被误认为是微生物污染。
（3）胆固醇、脂肪酸酯以及一些蛋白质。他们也是中出现沉淀物的常见原因。
软琼脂培养克l隆形成试验基本步骤:
(1)取对数生长期细胞，用0.25%胰蛋白酶---并轻轻吹打，使之成为单细胞，作活l细胞计数，用含20%胎牛血l清的dmem培养液调整细胞密度至1x106细胞/l。然后根据实验要求作梯度倍数稀释。
(2)用蒸馏水分别制备出1.2%和0.7%两个浓度的低溶点琼脂糖液，高压灭菌后，维持在40日中不会凝固。
(3)按1:1比例使1.2%的琼脂糖和2xdmem培养基(含有2x和20%的小牛血l清)混合后，取3ml混合液注入直径6cm平皿中(10cm平皿加7~ 10ml)，冷却凝固，可作底层琼脂置co2温箱中备用。
(4)按1:1比例让0.7%的琼脂糖和2xdmem培养基在无菌试管中相混以后，细胞实验外包，再向管中加入0.2ml的细胞悬液，充分混匀，注入铺有1.2%琼脂糖底层平皿中，逐形成双琼脂层。待上层琼脂凝固后，置入37回5%co2温箱中培养10~14天。
(5)把平皿放置在倒置显微镜下，河北细胞实验，观察细胞数。计算形成率。软琼脂培养法常用检测肿l瘤细胞和转化细胞系。试验中琼脂与细胞相混时，琼脂温度不宜超过40日。接种细胞的密度每平方厘米不超过35个，一般6cm的平皿接种1000个细胞。正常细胞在悬浮状态下不能增殖，不适用于软琼脂克l隆形成试验。
软琼脂集落形成率实验(软琼脂克l隆)
将1.2%低熔点琼脂糖与2x细胞培养基以1:1的体积比混合制备0.6%的底层琼脂，6孔板中每个孔1.4ml温室凝固，取对数期细胞，胰酶---后吹散成单个细胞悬液，计数，并调细胞浓度为10000个/ml，将0.6%低熔点琼脂糖与2x细胞培养基以1:1的体积比混合，细胞实验外包公司，制备0.3%的上层琼脂，每孔加1ml 上层琼脂和100ul单细胞悬液(约1000ell/wel)， 混匀，室温凝固。置于37目，5%co2的细胞培养箱中培养2-3周，计数含50个细胞以上得克l隆，计算细胞集落形成率，spotll 采集图像。
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