山西细胞实验-英瀚斯生物科技公司-细胞实验外包费用

q:中的沉淀物对细胞培养有什么影响？

a:（1）细胞生长，我们的试验以及经验表明沉淀物不会影响细胞培养，我们的客户以及其它生产商也证明了这一点。

（2）过滤，如果中出现大量的沉淀物，将很难过滤。一般说来，因为在生产工序中已经过 100nm 或者 40nm 的过滤处理，并且经过了严格的无菌检测，因此不再过滤用于细胞培养 的。在实验室中没有---再过滤处理，在---的细胞培养中往往将直接加到培养基中一起 过滤。

（3）污染，细胞实验外包，磷酸钙往往被误认为微生物污染而引起。研究者可能会在中观察到一些絮状的 沉淀，因此就会比较警觉的去做无菌试验，将放在培养箱中培养几天，结果可能会观察到更多的絮状 沉淀，因此就断定被污染了。并且当研究者将样品放在倒置显微镜下观察时往往可以看到一些可 以运动的小黑点，因此就确认是被污染了。于是，研究者就会花费更多的时间和精力来和生产商 确认，但终确定没有被污染而只是沉淀。为了避免这些问题的发生，我们建议不要直接将放在 培养箱中培养观察是否有菌，而是将加到琼脂板上进行培养以观察是否有---生长。另外，也可以进 行革兰氏染色，在油镜下观察，以确认是否有污染。

细胞实验介绍——流式细胞术检测细胞周期和凋亡

流式细胞术检测细胞周期：

细胞周期：指细胞从---次分裂结束起到下一次分裂结束为止的活动过程，通常由g0/g1期、s期、g2期和m期组成。g0/g1期：有丝分裂发生，细胞分裂成两个细胞，进入下一个细胞周期，或者进入静止期（g0期），而g0期从dna含量上无法与g1期区分，细胞开始rna和蛋白质的合成，但dna含量仍保持二倍体。s期：dna开始合成，细胞核内dna的含量介于g1期和g2期之间。g2期和m期：当dna成为4倍体时，细胞进入g2期。g2期细胞继续合成rna及蛋白质，直到进入m期。

pi法是---的周期检测方法。pi为插入性---荧光染料，能选择性的嵌入---dna和rna双链螺旋的碱基之间与之结合，其结合的量与dna的含量成正比例关系，细胞实验外包费用，用流式细胞仪进行分析，就可以得到细胞周期各个阶段的dna分布状态，从而计算出各个期的百分含量。

一般流程：细胞收集-70%酒精固定过夜-pi染色-流式细胞仪检测。

细胞凋亡：细胞凋亡的早期就有细胞膜表面破损发生。破损时凋亡细胞表面的磷脂腺丝氨酸(ps)可以从细胞内膜翻转至细胞的外膜。该过程发生在之前，山西细胞实验，检测ps的表达，能反映早期凋亡。annexinv是ca2+依赖的磷脂结合蛋白，对ps有---的亲和性，并且可以与暴露于细胞外的ps相结合。利用这一原理，可以将annexinv标记荧光来识别早期的细胞凋亡。通常利用annexinv-fitc和碘化丙啶(pi)来区分凋亡和坏---。pi的膜通透性很差，因而只能标记坏死的细胞。

一般流程：细胞收集-pi-annexinv标记-流式细胞仪检测。

结果示例：

                                   图 a 细胞周期检测图；b 细胞凋亡检测图