膀guang炎:
大部分情况下,膀guang炎由---感ran所致,无锡动物模型,膀胱感ran可能引起疼痛并令人烦恼。如果感ran扩散至shen脏,动物模型实验外包,可能发展为---的健康问题。
膀guang炎还可能作为对某些yao物或放she---的反应出现。某些因素有时会---膀胱,例如卫生产品、sha精凝胶或长期使用导管,这也可能引发膀guang炎。膀guang炎还可能作为另一种---的并fa症出现。
实验材料
c57bl/6小鼠
1-2x108cfu/ml大肠杆jun悬液
24g留置针
注she器
10%水合氯醛
方法步骤1、小鼠称量体重后按照重量使用10%水合氯醛进行ma醉。
2、ma醉后的小鼠用胶布固定于板上
3、触摸小鼠下腹部,摸到鼓包时确定小鼠膀胱所在位置,轻柔按压膀胱,排空尿液。
4、使用碘酊消毒niao道口,使用合适的留置针润滑后从niao道外口插入膀胱。
5、成功后缓慢注入50微升大肠gan菌悬液,动物行为学,留置针可保留至小鼠su醒前,防止漏液6、注射完成后,小鼠放回笼中,等待自然su醒,正常饲养。实验案例
给药24小时后,形态学可见大量炎性细胞浸润
组织水肿,膀胱上皮脱落。
五、注意事项
1. 小宫设备和实验程序与大鼠类似,但迷宫规格应比大宫小,以免增加小鼠行为操作难度。
2. 本实验也可只用来测定工作记忆。方法中不同的是,在所有臂均放置食粒,而不是只选4个臂放置食粒。
3. 慢性应激对动物的迷宫操作可产生影响,且存在性别差异。经过慢性应激以后,雄性大鼠---减弱,表现为记忆错误频率增加;雄性大鼠的空间记忆反而增强,表现为错误频率减少。
4. 即使在---进食条件下,也应让大鼠体重每周增加5g,以免动物因营养---而患病。剔除身体状态---的动物。
5. 迷宫周围的任何一件物品均可被动物用来作为空间定为的标志。去除或移动这些标志可能使动物操作困难并降低迷宫臂选择的准确性。
一、主要试剂材料
细胞自噬染色检测试剂盒(mdc法)(solarbio,g0170)
dmem(hyclone,sh30023)
fbs(hyclone,sh30070.03)
青链mei素(hyclone,sv30010)
胰酶(hyclone,sh30042.01)
pbs(南京生兴,sn331)
co2培养箱(thermo fisher,3131)
confocal荧光显微镜(zeiss,lsm710)
二、实验方案
1、mg63及其耐药株培养在含10%胎牛xue清的dmem完全培养基中培养,培养在37℃含5%co2的细胞培养箱中培养,动物模型购买,当---至80%-90%时,用胰酶将细胞---下来,按照1:3比例传代。
2、将1×106个细胞种在3.5cm玻璃底培养皿中,将细胞放入培养箱中培养过夜后,分别加入mir-22、cisp1atin、cisp1atin和mir-22后,将细胞放入培养箱中培养12h、24h。3、将细胞从培养箱中取出,去除培养基,用300~400μl的1×wash buffer清洗细胞1次,弃上清。4、加入适量mdc stain,轻轻混匀。5、室温避光染色15~45min。6、用300~400μl的1×wash buffer清洗细胞2次,弃上清。7、加入100μl的collection buffer重悬细胞,滴加于载玻片上并加盖玻片。8、荧光显微镜下观察(激发滤光片波长355nm,阻断滤光片波长512nm),拍照。
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