细胞实验外包公司-英瀚斯-铜川细胞实验

关于细胞培养的常见问题:

q: 细胞在培养过程中出现碎片如何处理？

a: 贴壁细胞在移除原培养液后，细胞实验外包选，用 pbs 冲洗 2-3 遍；悬浮细胞离心移除原培养液后，加入 pbs 重悬，细胞实验外包费用，离心移除 pbs; 一般建议重复上述步骤 2-3 遍，用 800-1000rpm 离心 3-5 分钟。

q：细胞冻存能放在 -80℃ 保存吗？

a：长期保存的细胞应当放在液氮（-196℃）中保存，短时间（一般 1 周-2 周）可以存放在 -80℃。

q：培养瓶是用密封盖好，还是用透气盖好？

a：都可以。只是在使用密封盖培养瓶时，瓶盖旋至约 2/3，不要完全拧紧，预留约 1/3 以便细胞可以透气；有些品牌的密封盖培养瓶的瓶盖上有适合位置指示标志。

q:何谓 fbs，fcs，cs，hs?

a: fetal bovine serum(fbs)和 fetal calf serum(fcs)之间没有区别，都是指胎牛；fcs 不是正规命名，尽量不使用。calf serum（cs）则是指小牛。horse serum(hs)则是指马。

大鼠gu髓间充质gan细胞的分离

操作方法

(1 )取sd大鼠( 2周龄)，颈椎脱臼法处死后立即用75%---浸泡，移入超净工作台内，用大头针固定大鼠四肢于工作台面的泡沫板上。

(2)碘酒擦拭四肢，再用酒精棉球擦拭，细胞实验外包公司，无菌条件下用灭菌消毒后的镊子和剪刀分离出大鼠股骨和胫骨，剔除骨头表面肌肉， pbs溶液冲洗两遍。

(3 )从中间剪断股骨和胫骨，用2ml无菌注she器吸取dmem/f 12溶液冲出gu髓细胞多次，再用针头吹打，吸管吸入离心管内，1000r/min离心5min，弃上清，用pbs重悬细胞。

(4 )缓慢将细胞悬液加入预先装有5ml淋巴细胞分离液的15ml离心管内，铜川细胞实验，保持细胞悬液在淋巴细胞分离液上层，注意不要搅动液面，保持二者分层界面。

(5 ) 2000rpm离心15-25min，离心后溶液分4层，吸取中间骨sui基质细胞层(白色浑浊状)， pbs洗三次。

(6)用含15%胎牛xue清及青链mei素的dmem/f 12以106/ml的细胞浓度接种于25cm2培养瓶中， 置37°c、5%co2恒温培养箱中培养。

( 7 ) 24小时后弃去培养液(看细胞贴壁情况)，pbs冲洗2-3次去除末贴壁细胞，加入培养液继续培养。以后每3d半量换液1次，-般10d细胞生长融合。

(8 )经0.25%胰酶---，1 : 2传代，其后一般3-5d传代1次，选取生长---的第三代细胞进行后续实验。