一、实验概述
八臂迷宫(radial arm maze)实验是为常用的评价动物学习记忆能力的模型之一,由olton等人于20世纪70年代中期建立。其基本依据是,实验动物,控制进食的动物受食物的驱使对迷宫各臂进行探究,经过一定时间的训练,眉山动物实验,动物可记住食物在迷宫中的空间位置。该方法可同时测定动物的工作记忆(working memory)和参考记忆(reference memory)。八臂迷宫操作简便、可行,而且能区分短期的工作记忆和长期的参考记忆,现已被广泛用于学习记忆功能评价。
二、实验仪器
敲低效果验证方法:
rt-pcr
检测mrna,是否仍存在靶 mrna?或是否敲低成功?
这种方法非常灵敏,但无法准确预测蛋白质水平。
蛋白质印迹实验
使用抗ti来检测样品中的靶蛋白表达以及多种相关蛋白质表达,从而观察靶蛋白敲除对其它蛋白质的影响。
免yi细胞化学法
可检测是否存在敲低蛋白。
其优势在于利用双重染色法,可同时检查敲除对其它蛋白质表达的影响以及其它蛋白质在细胞中的位置。
高架十字迷宫行为学检测:
实验步骤
1、实验之前,一定要---高架十字迷宫整个装置的清洁。这个步骤不仅仅是要求当天的实验,侧重于每一次动物实验完成后的清洁除味工作,一定要去除上一只动物在宫体内---下来的尿液、粪便等,可以做动物实验的公司,尽可能创造一个清洁、无味道的理想试验环境。同时,实验员需要记录动物的编号、日期、状态等信息;实验动物提前运送到行为学实验室临时笼架 ,
适应环境至少3h左右, 减少动物紧张。
2、将实验动物(大鼠或者小鼠)从饲养笼中取出,实验动物尽量背向实验员,将动物轻轻放在仪器宫体的中央区域,动物实验室,动物面向开臂,然后实验员迅速安静的离开;
3、打开supermaze或者visutrack动物行为分析软件,---动物在高架十字迷宫仪器内的轨迹运动,自动计算指标,通常实验时长为5min;
4、实验结束后,取出实验动物,放入饲养笼,做好实验完成动物的标记信息,同时,用酒精和纸巾清洁迷宫。
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