agomir是一种用于微rna功能研究的化学修饰的双链微rna模拟物,它可以模仿内源性的成熟微rna,与靶基因mrna结合,从而调节其表达。agomir与普通的微rna模拟物相比,具有更高的稳定性和活性,更易通过细胞膜和组织间隙,富集于ba细胞。因此,北京动物模型,agomir可以用于体内实验,通过注射、吸入或喂食等方式给予动物,观察微rna对生理和病理过程的影响。
agomir的合成需要对微rna模拟物进行特殊的化学修饰,包括在反义链上加入2个liu代磷suan酯键(phosphorothioate)在5′端,4个liu代磷suan酯键在3′端,动物模型构建公司,以及3′端加入胆固醇(cholesterol)基团,同时对全长核苷酸进行2′-甲yang基(2′-methoxy)修饰。这些修饰可以提高agomir的稳定性,防止被---酶降解,增强其与细胞膜的亲和力,促进其进入细胞。
pas染色:pas染色法(periodic acid-schiff stain)在组织学上,主要用来检测组织中的糖类。过碘suan把糖类相邻两个碳上的---氧化成醛基,再用schiff试剂(碱性品红与亚liu---钠)和醛基反应使呈现紫红色。实验仪器和材料
无水---
二jia---
高碘suan
偏重---酸钠
碱性品红
苏mu素
中性树胶
实验步骤
1、石蜡切片脱蜡至水:依次将切片放入二ija---ⅰ20min-二jia---ⅱ20min-无水---ⅰ10min-无水---ⅱ10min-95%酒精5min-90%酒精5min-80%酒精5min-70%酒精5min-蒸馏水洗。2、高碘suan溶液处理:切片入高碘suan溶液10min,流水冲洗5min。3、schiff试剂处理:切片入schiff试剂10min,流水冲洗5min。4、苏mu素染色:切片入苏mu素染液1min,流水冲洗5min。5、快速脱水:将切片依次放入95%酒精i 5min -95%酒精ii 5min-无水---ⅰ5min -无水---ⅱ5min -二jia---ⅰ5min -二甲benⅱ5min中脱水透明,将切片从二甲ben拿出来稍晾干,中性树胶封片。6、显微镜镜检,图像采集分析。
染色结果:糖原呈红色,细胞核蓝紫色。
注意事项
染色后标本应及早观察和记录,染色后标本保存8天后,将逐渐褪色,动物实验,保存时间延长,褪色更为明显。
小鼠模型构建方法
:
可由---、---或---引起。
微生物(如引起的)可。衣原体和单纯---也可引起。男性,基因敲除,十分常见。也可女性,但、、、和等更易于被。 也可以由通常引起其他的---引起,如大肠。
实验材料
小鼠
铜绿假单胞菌pao1
方法步骤
1、小鼠称量体重后按照重量使用10%水合氯醛进行。
2、后的小鼠仰卧保定。
3、小鼠腹部剃毛。使用碘酊消毒下腹部,在下腹部沿腹中线剪开一个1.5cm的口子,暴露膀胱。
4、经插管将铜绿假单胞菌pao1 (1×108cfu/ml) 接种到膀胱中。
模型小鼠的膀胱表现出---的、
中性粒细胞的大量浸润以及固有层的---和水肿。
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