透射电子显微镜-凉山扫描电镜-英瀚斯生物科技

 病理实验外包，南京英瀚斯可开展冰冻切片荧光染色1.  冰冻切片室温晾干15 min，可用含10%正常山羊的pbs室温封闭切片1小时（此步可不洗）。2.  滴加适当比例稀释的一抗或一抗工作液（的量视组织大小而定，原则是可以均匀覆盖组织面，且---整个过程中不会使组织干涸）。3.  将切片放在加了pbs的组化湿盒，室温孵育2小时或4℃过夜。4.  第二天先将湿盒放到37℃回温1 h，然后吸取片上的一抗进行回收，将切片插入到小染缸pbs冲洗。5.  滴加用pbs稀释好的二抗（避光）置于分子杂交箱中37℃孵育1小时。回收二抗，切片置于染缸内，透射电子显微镜，pbs洗5 min×3次。6.  滴加dapi工作液染核，室温10~20 min（工作浓度0.1%染色15 min）。7.  回收dapi，滴加5-10 μl 抗荧光衰减封或中性树胶，用处理干净的盖玻片封片，凉山扫描电镜，即可到荧光显微镜或者共---显微镜下。8.  做好的片放在切片盒内，置于4℃冰箱，可保存一周左右。

 病理实验外包，扫描电镜和透射电镜的区别，病理染色切片常见问题及解决方法：1.切片弯曲且不能形成直带

●原因：蜡块上下或左右两边不平行。蜡块与切片刀刀口不平行。组织块外形不整齐。切片刀各处的锋利程度不一致。

●解决方法：将蜡块四边反复修平对称。调节蜡块夹持器，使其与切片刀平行。修整组织块时，注意修切整齐。移动切片刀，sem扫描电镜，更换刀口位置。2.切片上出现裂纹

●原因：切片刀上有小缺口，或刀口不平整。组织中可能含有较硬之物质，如固定液之结晶石灰质。包埋时石蜡---太慢。

●解决方法：切片刀某处有缺口，可调换刀口部位或重新磨刀。刀口上缺口过多且不平整，可先将刀锋垂直在磨刀石上轻轻磨数次，然后按常规磨刀田。组织中硬性物质太多，则不宜用。纠正包埋时的缺点。一般待蜡块周围凝结一层，即可放入冷水中。南京英瀚斯，的病理染色实验服务平台。