动物模型实验-动物模型-英瀚斯

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    2024-1-19

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脑组织组化实验

1. 灌注固定用的针头,一般都用注she针头。灌注大鼠一般可用 10 到 12 号针头,小鼠可用 6、7 号针头,但很重要的一点是要把针头的磨钝而不是用锐利的针头。

2. 关于穿刺:灌注大鼠时要把穿刺针的插入到升主动脉内,但不宜进入升主动脉过长,在动脉内见到针头或插入约 1mm 左右即可;灌注小鼠时只要把针头插入左心室内即可,不---插入到升主动脉内。操作的要点是:,操作要迅速,剪开膈肌后,迅速沿腋前线剪开胸壁,并把胸前壁往上翻,暴露---;第二,一定要在明视野下操作,要剪开心包壁层的前壁,暴露升主动脉和肺动脉干的根部,---穿剌针能进入升主动脉;第三,穿刺之前要用适当大小的血管钳夹住心室以固定---,但不要夹得过紧,要让心腔内留有一定的间隙,动物模型制作,然后在心尖处轻轻旋转针头插入穿刺针。也可以用小剪刀在心尖处先剪开一个小口再插入穿刺针;第四,穿刺方向要正确,动物实验外包,从心尖部开始,从左下方斜向右上方,动物模型实验,若遇阻力要改变方向再试,不要用力蛮插。

3. 灌注用生理盐水的量大鼠用 50ml 左右,小鼠用 10ml 左右,一般以从右心耳流出的液体清亮为标准;4% ---用量约相当于老鼠体重,如 300 克的老鼠用 300ml 左右。小鼠一般用 20-30ml。灌注速度先快后慢,可持续 1-2 个钟头,也可以稍快。取脑后置脑块于 4% ---内 4 度后固定 4-6 个钟头。








pas染色法
pas染色:pas染色法(periodic acid-schiff stain)在组织学上,主要用来检测组织中的糖类。过碘suan把糖类相邻两个碳上的---氧化成醛基,再用schiff试剂(碱性品红与亚liu---钠)和醛基反应使呈现紫红色。实验仪器和材料

无水---

二jia---

高碘suan

偏重---酸钠

碱性品红

苏mu素

中性树胶

实验步骤

1、石蜡切片脱蜡至水:依次将切片放入二ija---ⅰ20min-二jia---ⅱ20min-无水---ⅰ10min-无水---ⅱ10min-95%酒精5min-90%酒精5min-80%酒精5min-70%酒精5min-蒸馏水洗。2、高碘suan溶液处理:切片入高碘suan溶液10min,流水冲洗5min。3、schiff试剂处理:切片入schiff试剂10min,流水冲洗5min。4、苏mu素染色:切片入苏mu素染液1min,流水冲洗5min。5、快速脱水:将切片依次放入95%酒精i 5min -95%酒精ii 5min-无水---ⅰ5min -无水---ⅱ5min -二jia---ⅰ5min -二甲benⅱ5min中脱水透明,将切片从二甲ben拿出来稍晾干,中性树胶封片。6、显微镜镜检,图像采集分析。

染色结果:糖原呈红色,细胞核蓝紫色。

注意事项

染色后标本应及早观察和记录,染色后标本保存8天后,将逐渐褪色,保存时间延长,褪色更为明显。


1.3改良多平台睡眠剥夺法

在mmpm --- 10 只大鼠(具体数目可根据实际需要确定)同时放在装有 14 或 15 个台的水槽中(长 127 cm ,宽 44 cm ,高 45 cm )进行实验,这样既避免了 sp及m p中单只大鼠与群体隔离的缺点,又保留了 m p 中活动范围增大的特点,因在实验时大鼠多是 3 只或 4 只一笼进行饲养,如 1 组实验需 10 只大鼠,则需要3笼或 4笼大鼠,考虑到来自不同笼的大鼠放在一起实验也可能造成群体的不稳定,动物模型,有学者将实验方法进一步改良,将实验所需的 10 只大鼠放在同一只笼中饲养 2 周,实验时再将这些大鼠放在一起同时进行睡眠剥夺实验,这样以克服实验时大鼠群体不稳定的缺点,从而将实验时的不确定因素减至低! 实验研究发现在mmpm中经采取措施保持大鼠群体稳定性及避免大鼠与群体分离后 大鼠上腺重量%体重减轻量%中促上腺皮质(a cth )和上腺皮质酮 (co rt) 的含量均较m p中为低,提示m m pm 较 m p 具有---的应激性,是较为理想的rem 剥夺方法。






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