脑缺血再灌注模型的评价方法主要有以下几种,一种是神经功能评分,另一种是脑梗死体积测量,还有一种是分子生物学检测。神经功能评分是通过对动物的行为和运动能力进行观察和打分,反映脑缺血再灌注损伤对神经功能的影响,常用的评分方法有bederson评分、gar---评分、zeiler评分等。脑梗死体积测量是通过对动物的脑组织进行染色和切片,计算脑梗死区域的面积和体积,反映脑缺血再灌注损伤对脑组织的损害,常用的染色方法有ttc染色、he染色、nissl染色等。分子生物学检测是通过对动物的脑组织或---进行提取和分析,检测脑缺血再灌注损伤相关的基因、蛋白、酶、因子、氧化应激指标等,反映脑缺血再灌注损伤的分子机制和信号通路,常用的检测方法有rt-pcr、western blot、elisa、组化等。
3.动物麻zui 以3.6%水合氯醛腹腔内注---zui(10ml/kg),注射qi针头从腹部向头方向刺入腹腔,回抽针芯阻力较大、无---、无---内容物时,缓慢推注。约10min后大鼠逐渐瘫软,反应淡漠,用手牵拉鼠尾无明显---时置仰卧位,固定上颌中切牙和四肢。实验过程中维持大鼠肛温在37℃左右,直到恢---动。
4.手术步骤 手术按外ke无菌原则操作。
备皮,碘伏消毒皮肤。
于正中线旁开约5mm处,行颈部右侧纵行切口,剪开浅筋膜,暴露右侧胸锁乳突肌,在胸锁乳突肌与颈前肌群之间向深部钝性分离,暴露颈动脉鞘,玻璃分针游离颈总动脉(cca)和迷走神经,直至 cca分叉处。钝性分离向内行走的颈外动脉(eca)及向外后行走的颈内动脉(ica)。
大鼠脑缺血-再灌注模型实验原理
大脑中动脉(mca)为---上发生脑缺血损伤zui常见的部位之一。故大脑中动脉阻塞(mcao)模型被广泛用于局灶性脑缺血的研究。用血管内线栓阻断法制备大鼠 mcao模型。已被脑血管病研究者广泛接受和采用。
是研究局灶性脑缺血zui常用的造模方法。该方法利用尼龙线栓从一侧颈总动脉或颈外动脉阻断mca供血造成局灶性脑缺血,缺血一定时间后回撤线栓,缺血区可通过脑底动脉环由对侧的颈内动脉、椎基底动脉和脑动脉皮质支的侧支循环实现再灌注。
目前实验室较多采用mca阻断120min、0min及90min的短暂脑缺血-再灌注模型。
实验材料与方法
(一)实验材料
1.实验动物 sd雄性大鼠,体重250~300g,清洁级。
2.所需手术材料 器械盘,3.6%水合氯醛,---5ml注射qi,尼龙鱼线(直径0.26mm,日本产,按要求制好备用),备皮剪、小杂物盘、眼ke直剪,眼ke弯剪,眼ke直镊,脑缺血再灌注模型建立,眼ke弯镊,止血钳,持针器,玻璃分针,手术缝针,0号手术线,无菌棉签,碘伏,生理盐水等。
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