细胞实验介绍——细胞运动能力检测:
细胞划痕实验是体---拟细胞迁移能力和修复能力快捷的检测方法。在长满的细胞培养板或者培养皿中,细胞培养技术,沿着中线使用移液器头或者其他硬物划1-3条平行的直线,细胞,去除中线的细胞,细胞在0h、12h、24h后,观察细胞往中线迁移情况,判断细胞迁移能力。
一般流程:细胞接种培养-划痕-不同时间点拍照
细胞迁移和侵袭实验是体---拟细胞迁移和侵袭能力的检测方法。使用不同孔径的聚---膜transwell小室放入培养板中,将细胞接种于小室中,利用培养液成分的差异---细胞运动,流式细胞实验,检测细胞的迁移和侵袭能力的差异。
一般流程:transwell小室准备-细胞接种-细胞培养-transwell小室染色-显微镜拍照
结果示例:
图 a 细胞划痕实验图;b,c 细胞迁移和侵袭实验图
自噬(autophagy)是细胞受到---后吞噬自身的细胞质或细胞器,终将吞食物在溶酶体内降解的过程,自噬体(autophagosome)为双层膜包被的圆形或椭圆形结构,内含细胞质、长寿蛋白质和异常蛋白---物,损伤或多余细胞器如线粒体、粗面内质网和微体、
---和---等。单丹---尸胺(dansylcadaverine,mdc是一种荧光色素,是嗜酸性染色剂,通常被于检测自噬体形成的特---标记染色剂,其检测激发滤光片波长355nm ,阻断滤光片波长512nm。leagene mdc染色液适用于培养细胞的自噬染色,可与eb合用双染。
透射电镜观察自噬小体方法
利用光学显微镜,细胞迁移实验,借助相应的染色方法,可以观察细胞凋亡时会出现的一系列形态特征。常用的染色法包括台盼蓝、橙 / 化乙啶(ao/eb)、giemsa 和 he 法等。在光学显微镜下可以观察到核固缩、质浓缩和凋亡小体等典型的凋亡现象。
电镜形态学观察法是一种比较---、---的方法,被认为是确定细胞凋亡的金标准。电镜下凋亡细胞表现为染色质凝集、核浓缩、核裂解、胞浆收缩和胞膜具有发泡现象及凋亡小体出现等。
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