细胞传代培养
操作步骤
1.将长满细胞的培养瓶中原来的培养液弃去。
2、加入0.5- -1ml 0.25%胰酶溶液，使瓶底细胞都浸入溶液中。
3、瓶口塞好橡皮塞，放在倒置镜下观察细胞。随着时间的推移，原贴壁的细胞逐渐趋于圆形，在还未漂起时将胰酶弃去，加入10m培养液终止---。观察---也可以用肉眼，当见到瓶底发白并出现细zhen孔空隙时终止---。一般室温---时间约为1- -3分钟。
4、用吸管将贴壁的细胞吹打成悬液，分到另外两到三瓶中，实践培养液塞好橡皮塞，置37°c下继续培养。第二天观察贴壁生长情况。
附:---液配制方法:
称取0.25克胰酶蛋白酶(活力为1 : 250)， 加入100ml无ca2+、mg2+的hanks液溶解，滤器过滤chu菌，4°c保存，用前可在379c下回温。胰酶溶液中也可加入edta，使zui终浓度达0.02%。
透射电镜观察:可见凋亡细胞表面微绒毛消失，核染色质固缩、边.集，常呈新月形，核膜皱褶，胞质紧实，细胞器集中，江西细胞实验，胞膜起泡或出“芽”及凋亡小体和调亡小体被临近巨噬细胞吞噬现象。
结果评判:调亡细胞体积变小，细胞质浓缩。调亡i期( pro-apoptosis nuclei)的细胞核内染色---度盘绕，出现许多称为气穴现象( cavitati)的空泡结构; iia 期细胞核的染色---度凝聚、边缘化;细胞凋亡的晚期，细胞核裂解为碎块，细胞实验外包费用，产生调亡小体。
关于细胞培养的常见问题
q：培养液到底要不要加双抗（青&链）？
a：双抗不是细胞生长必需的。我们培养细胞时不常规使用，细胞实验外包公司，因为连续使用会促进耐药性细胞株的产生，导致轻度污染持续存在。一旦将从培养液中去除，细胞实验外包，这种轻度污染终将发展成为---污染。具体情况，可根据自己实验室的环境，自行决定是否使用双抗。
q：细胞培养，能更换成其它种类的培养基吗？
a：我们---建议好使用细胞提供机构或细胞库的生长培养液。有些细胞可能会适应在不同培养基中生长，在做好保种的条件下，可以分出部分细胞做测试。
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