药xiao学实验----功能的动物试验评价方法
1 测试项目
1.1 原理
这种方法是用高热量食物---动物肥胖,然后给试验样品(肥胖模型),或者同时给高热量食物给试验样品(肥胖预防模型),观察其变化动物体重和体脂含量。
1.2 肥胖模型法
spf级雄性大鼠,体重180-220g,8-12只/组。在屏障系统下,给大鼠喂养维持饲料并观察5-7天。按体重随机分为两组,10只给予维持饲料作为空白对照组,60只给予高热量模型饲料。每周记录喂食量、洒食量、剩食量,称体重1次。喂养2周后,将给予高热量饲料的60只大鼠按体重增加进行排序,剔除1/3体重增加较低的抗肥胖大鼠。选取40只肥胖敏感大鼠给予高热量饲料6周,空白对照组同时给予维持饲料。
小鼠模型构建方法
:
可由---、---或---引起。
微生物(如引起的)可。衣原体和单纯---也可引起。男性,十分常见。也可女性,但、、、和等更易于被。 也可以由通常引起其他的---引起,如大肠。
实验材料
小鼠
铜绿假单胞菌pao1
方法步骤
1、小鼠称量体重后按照重量使用10%水合氯醛进行。
2、后的小鼠仰卧保定。
3、小鼠腹部剃毛。使用碘酊消毒下腹部,可以做动物实验的公司,在下腹部沿腹中线剪开一个1.5cm的口子,暴露膀胱。
4、经插管将铜绿假单胞菌pao1 (1×108cfu/ml) 接种到膀胱中。
模型小鼠的膀胱表现出---的、
中性粒细胞的大量浸润以及固有层的---和水肿。
2---运动睡眠剥夺法
此类睡眠剥夺方法形式多样,在脑电监护情况下可行全部的睡眠剥夺和选择性的睡眠剥夺。其共同特点是通过动力装置迫使大鼠---地运动,从而达到睡眠剥夺的目的。此类方法的优点是睡眠剥夺效果明显,睡眠剥夺的时间及强度易于掌握,重复性好,无须实验人员随时观察实验情况,动物实验,减轻了实验人员工作强度。缺点是长时间运动引起机体的一系列应激反应可能干扰睡眠剥夺的实验结果,现选取其中两种有代表意义的方法介绍如下
2.1水平转盘睡眠剥夺法
此方法应用广泛,于 1983 年先应用在睡眠剥夺实验中,实验装置由一个电脑控制台、一个水平转盘及两个开放的长方形有机玻璃缸组成,实验动物,转盘直径为 46 cm,在电脑控制下可以按顺时针逆时针方向随机水平转动! 两只有机玻璃缸的尺寸均为长60 cm ,---前动物实验,宽20.5 cm,高 60 cm 。在距离缸底 5 cm 处的缸侧壁开有一条缝隙,使转盘的一半能分别从缝隙伸入两只玻璃缸中并能随意转动。缸底留置水约 2 cm 深,转盘离水面约3 cm 实验前1周将睡眠剥夺大鼠头颈部植入微电极 并将微电极与电脑控制台相连,将大鼠放在转盘上适应环境1周,每天约1 h让大鼠习惯在转盘上活动,进水,进食等。实验时将实验组的大鼠及对照组的大鼠分别置于两只缸中的转盘上,当电脑通过微电极监测到实验组大鼠进入慢波或快波睡眠的脑电信号后,立即发出指令使转盘转动 6 s(6 s内转动 1/3 圈),当大鼠被转到玻璃缸壁时,因被玻璃缸壁挡住而可能掉入水中,每次在实验组睡眠剥夺大鼠进入睡眠时转盘即转动 6 s,方向随机,转盘转动时两只大鼠均被动地随着转盘移动。此方法一次只剥夺一只大鼠睡眠,当实验组的睡眠剥夺大鼠在活动、进水、进食时转盘并不转动而此时对照组的大鼠则可趁机睡觉以弥补被剥夺的睡眠。此方法中睡眠剥夺组大鼠与对照组大鼠条件极其相似,因而可减少因实验条件不同而所致的应激反应。
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