步骤
1.将缝合线切成大约 20 mm长每段,对于体重 25-30g 的小鼠使用直径为 0.21-0.22mm 的缝合线。
2.高压灭菌手术器械,75% 酒精擦拭手术台和相关设备进行消毒。
3. 采用气体麻zui(异fu烷),将鼠置于仰卧位,放在加热垫上,检测体温在 36.5-37.5°c 之间。
4.使用电动剃毛器将颈部的毛发剔除,暴露皮肤。用 75% 酒精消毒手术部位三次。
5.在立体解剖显微镜下,在颈部开一个 1cm 长的中线切口,使用牵开器暴露手术区域,并识别右侧颈总动脉(cca),颈外动脉(eca)和颈内动脉(ica)。仔细分离动脉,使其脱离周围神经和筋膜。进一步将eca 和---上动脉(sta)分支用电凝笔凝固。在凝固段切断 eca 和 sta。
待动物脑缺血再灌注模型su醒后,给予足够的食物和水分,每天检查动物的体重、精神和活动等情况根据实验计划,在规定的时间点对动物进行行为学评价、神经功能评价、脑组织取样、脑血流测量、生化指标检测、分子生物学检测等方法,以评估脑缺血再灌注损伤的程度和机制。脑缺血再灌注模型是一种复杂的病理过程,涉及多种因素和途径。目前认为,脑缺血再灌注损伤主要包括能量代谢障碍、细胞凋亡、yan症反应、氧化应激、谷氨酸激fa性毒性、钙超载、自噬等方面。
脑缺血再灌注模型的建立方法主要有两种,一种是线栓法,另一种是光栓法。线栓法是通过在颈外动脉或颈内动脉插入一根尼龙线或硅胶线,将其推送到mca的起始部位,造成mca的机械性阻塞,然后在一定时间后拔出线栓,恢复血流。线栓法的优点是操作简单、重复性好、缺血区域较大、再灌注效果较好,缺点是可能造成血管损伤、形成、血管---等,以及线栓位置不稳定、缺血程度不一致等问题。光栓法是通过在颅内动脉注射一种光敏剂,如玫瑰红素钠,然后用激光照射mca的分支,使光敏剂在血管内---,造成mca的化学性阻塞,脑缺血再灌注模型建立,然后在一定时间后停止激光照射,恢复血流。光栓法的优点是操作、创伤小、缺血区域可控、再灌注效果较好,缺点是操作复杂、设备昂贵、光敏剂可能有毒性或反应等问题。
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