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---是指同一来源的细胞逐渐产生出形态结构、功能特征各不相同的细胞类群的过程,其结果是在空间上细胞产生差异,在时间上同一细胞与其从前的状态有所不同。---的本质是基因组在时间和空间上的选择性表达,通过不同基因表达的开启或关闭,终产生---蛋白质。细胞---是指将一群不同类型或者形态结构、功能特征存在差异的细胞通过生物学、物理学等手段,将之转变为具有相似/相同形态结构、功能特征的细胞群体的过程。
brdu染色原理
brdu (5-脱氧尿核苷)是胸腺的衍生物,常用于标记中新合成的dna,可代替胸腺选择性整合到细胞中新合成的dna中(细胞周期s期)。这种掺入可以稳定存在,随着dna进入子细胞中brdu特---可以用于检测brdu的掺入,从而判断细胞的增殖能力。brdu特---可以用于检测brdu的掺入,从而判断细胞的增殖能力。
zhu射或细胞培养后利用抗brdu单,细胞实验外包,icc染色,显示增殖细胞。同时结合其它细胞标记物,双重染色,可判断增殖细胞的种类,增殖速度,对研究细胞动力学有重要意义。因组织细胞内无内源性brdu存在,所以brdu应用较广掺入双链dna内的brdu,细胞实验外包选,以氢链与腺呤结合,不能直接与抗brdu反应,需经解链使brdu暴露方能被染色。常用的解链方法为---加热、蛋白酶处理等,使dna双链部分单链化,抗brdu小鼠单与增殖细胞核内的brdu结合,再经酶标抗小鼠igg孵育、
细胞培养中常见的污染及解决方法
支原体污染
支原体是隐蔽的污染物,不能通过过滤去除。显微镜下没有任何可见的支原体污染迹象,比如细胞病变和浊度或 ph 值变化(即使在---污染的培养基中),这样就会导致我们产生错误的---。而在牛中,支原体是常见的微生物之一。
解决方法:通常的过滤灭菌方法对支原体没有影响。细胞一旦被支原体污染,---是对重要的细胞系,必须去除支原体,一般的方法有、抗和抗与补体联合。值得注意的是,支原体很---的结构特征是没有细胞壁。因此,它对作用于细胞壁的生物合成(如 β-内---类、万古等)完全不敏感,并且通常对多粘菌素、---和类具有耐药性。相反,四环素类和大环内酯类对支原体的抑制作用很强,而---糖苷类和氯的抑制作用较弱。
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