脑缺血再灌注模型的建立需要遵循一定的步骤和注意事项。首先,需要选择合适的动物品系、性别、年龄和体重,一般以sd大鼠或c57bl/6小鼠为常用动物,雌性或雄性均可,成年或亚成年均可,体重在220-270 g或20-25 g之间为宜。其次,需要在无菌的条件下进行手术操作,对造模动物进行ma醉、固定、剃毛、消毒等准备工作,然后沿颈部中线切开皮肤和肌肉,暴露颈总动脉(cca)、颈外动脉(eca)和颈内动脉(ica),并分别结扎或夹闭动物模型的相应的血管。
神经功能评价和行为学评价主要用于反映脑缺血再灌注模型动物的神经行为表现和损伤程度,常用的方法有longa评分法、bederson评分法、zealander梯形迷宫法、morris水迷宫法等。脑血流测量主要用于监测动物的脑血流变化和再灌注效果,常用的方法有激光多普勒血流仪、核ci共振灌注成像等。脑组织染色主要用于观察动物的脑组织结构和病理变化,常用的方法有ttc染色、he染色、nissl染色等。生化指标检测主要用于测定动物的---或脑组织中的一些相关物质的含量和活性,如乳酸脱氢酶、超氧化物歧化酶、---醛等 。分子生物学检测主要用于分析动物的基因表达和蛋白质水平的变化,如rt-pcr、western blot、免yi组化等。
脑缺血再灌注模型的建立方法主要有两种,一种是线栓法,另一种是光栓法。线栓法是通过在颈外动脉或颈内动脉插入一根尼龙线或硅胶线,将其推送到mca的起始部位,造成mca的机械性阻塞,然后在一定时间后拔出线栓,恢复血流。线栓法的优点是操作简单、重复性好、缺血区域较大、再灌注效果较好,缺点是可能造成血管损伤、形成、血管---等,以及线栓位置不稳定、缺血程度不一致等问题。光栓法是通过在颅内动脉注射一种光敏剂,如玫瑰红素钠,然后用激光照射mca的分支,使光敏剂在血管内---,造成mca的化学性阻塞,大鼠脑缺血再灌注造模,然后在一定时间后停止激光照射,恢复血流。光栓法的优点是操作、创伤小、缺血区域可控、再灌注效果较好,缺点是操作复杂、设备昂贵、光敏剂可能有毒性或反应等问题。
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