细胞实验外包-南京英瀚斯-丽水细胞实验

细胞实验介绍——细胞运动能力检测：

细胞划痕实验是体---拟细胞迁移能力和修复能力快捷的检测方法。在长满的细胞培养板或者培养皿中，沿着中线使用移液器头或者其他硬物划1-3条平行的直线，去除中线的细胞，细胞在0h、12h、24h后，丽水细胞实验，观察细胞往中线迁移情况，判断细胞迁移能力。

一般流程：细胞接种培养-划痕-不同时间点拍照

细胞迁移和侵袭实验是体---拟细胞迁移和侵袭能力的检测方法。使用不同孔径的聚---膜transwell小室放入培养板中，将细胞接种于小室中，利用培养液成分的差异---细胞运动，检测细胞的迁移和侵袭能力的差异。

一般流程：transwell小室准备-细胞接种-细胞培养-transwell小室染色-显微镜拍照

结果示例：

                                       图 a 细胞划痕实验图；b，c 细胞迁移和侵袭实验图

目的

学习和掌握外源基因导入真核细胞的主要方法——脂质体介导的转染。了解外源基因进入的一般性方法，观测外源蛋白的表达（绿色荧光蛋白），为染色准备实验材料。

实验原理

上图所示是脂质体介导转染的示意图，它显示了外源质粒进入细胞的一般过程。

外源基因进入细胞主要有四种方法：法、磷酸钙法和脂质体介导法和---介导法。法是在细胞上短时间暂时性的穿孔让外源质粒进入；磷酸钙法和脂质体法是利用不同的载体物质携带质粒通过直接穿膜或者膜融合的方法使得外源基因进入细胞；---法是利用包装了外源基因的---细胞的方法使得其进入细胞。但是由于法和磷酸钙法的实验条件控制较严、难度较大；---法的前期准备较复杂、而且可能对于细胞有较大影响；所以现在对于很多普通细胞系，一般的瞬时转染方法多采用脂质体法。

利用脂质体转染法重要的就是防止其毒性，因此脂质体与质粒的比例，细胞密度以及转染的时间长短和培养基中的含量都是影响转染效率的重要问题，通过实验摸索的合适转染条件对于效率的提高有---的作用。