英瀚斯-分子生物检测技术-南京分子生物检测

二、大肠菌群检验方法:

由于大肠菌群指的是具有某些特性的一组与粪便污染有关的---，即:需氧及兼性厌氧、在37°c能分解乳糖产酸产气的革兰氏阴性无芽胞。因此大肠菌群的检测一般都是按照它的定义进行。 目前国内采用的进出口食品大肠菌群检测方法主要有---和原商检局制订的行业标准。两个标准方法在检测程序上略有不同。

(一)---:---采用三步法，即:乳糖发酵试验、分离培养和证实试验。乳糖发酵试验:样品稀释后，选择三个稀释度，每个稀释度接种三管乳糖胆盐发酵管。36士1c培养48土2h，观察是否产气。分离培养:将产气发酵管培养物转种于伊红美蓝琼脂平板上，36士1°c培养18-24h，分子生物检测服务，观察菌落形态。证实试验:挑取平板上的菌落，进行革兰氏染色观察。同时接种乳糖发酵管36士1°c培养24土2h，观察产气情况。

报告:

根据证实为大肠阳性的管数，查mpn表，报告每100ml ( g)大肠菌群的mpn值。具体操作参见gb4789. 3-94 <---------食品卫生微生物学检验大肠菌群测定>

(二)原商检局制订的行业标准，等效采用美国fda的标准方法，用于对出口食品中的大肠进行检测。本方法采用两步法：推测试验:样品稀释后，选择三个稀释度，每个稀释度接种三管lst肉汤。36士1c培养48士2h，观察是否产气。证实试验:将产气管培养物接种煌绿乳糖胆盐(bglb)肉汤管中，36士1°c培养48士2h，观察是否产气。以bglb产气为阳性。查mpn表，南京分子生物检测，报告每ml(g)样品中大肠菌群的mpn值。具体操作参见sn0169-92<------进出口商品检验行业标准 出口食品中大肠菌群、粪大肠菌群和大肠检验方法>

southern杂交

实验原理

      southern印迹杂交（southern blot）是1975年由英---southern创建，是研究dna图谱的基本技术。southern印迹杂交是进行基因组dna特定序列定位的通用方法。一般利用琼脂糖凝胶电泳分离经---性内切酶---的dnal片段，将胶上的dna变性并在原位将单链dnal片段转移至尼龙膜或其他固相支持物上，经干烤或者紫外线照射固定，再与相对应结构的标记探针进行杂交，用放l射自显影或酶反应显色，从而检测特定dna分子的含量。