二、操作步骤：
1. 所有在纯化系统里使用的溶液当日都需要经过 0.22μm 的滤膜抽滤、脱气处理；保存 4℃ 冰箱里的缓冲液若要在室温使用需恢复至室温后抽滤脱气；
2. 样品上柱纯化前，需先滤膜过滤，少量样品可用离心（13000rpm，10min）；
3. 依次用水、缓冲液洗泵；设置流速和柱前警报压（压力值参阅层析柱及填料说明书，pcr实验室，取较小的一个大耐受压力）。防止柱中进入气泡，影响分离效果；
4. 当柱子限压在 0.3mpa，或者在限压状态---速很低时，ph valve 中的 restirtor 可以切换成 off line，即显示 by-pass 状态；
5. 当需要通过仪器上样环上样时，将 w1 阀口处换成带透明短软管的阀门，从此处阀门位通过倒吸样品上样；
6. 进样阀「inject」为上样状态。上样结束可将进样阀切换回「load」状态。并用纯水认真清洗上样环至少 3 次；将 w1 阀口处换回原来接头阀门。
7. 纯化结束后，用纯水清洗泵和平衡柱子；再用 20% 的---清洗泵以及系统。长期不用，层析柱应保存在 20% 的---中，泵放置在 20% ---中；
8. 实验结束后及时倾倒废液瓶里的废液；
5.长可以合成多长的引物？
答：引物越长，出现问题的概率就越大。有的公司合成过120base的引物，产率很低。除非需要，建议合成片段长度不要超过80mer，按照目前的引物合---率，80mer的粗产品，全长（还不一定正确）引物的百分比不会超过40%，后续处理还有丢失很多，的产量很低。
6.需要合成多少od数？
答：根据实验目的确定。一般pcr扩增，2 od引物，可以做200-500次50ul标准pcr反应。如果是做基因拼接或退火后做连接，1 od就足够了。但是有些研究人员，---，就做几次pcr，但是却要5-10 od。做全基因构建的引物都比较长，但是我们有些研究人员也要求高od数。片段越长， 全长得率就越低，出错的几率就越大。超出需要之外的od数要求，其实也是对社会资源的一种浪费，同时也从一个侧面反映了部分研究人员---是新手的自信心不足，总觉得需要重复多次才能成功。
rna提取处理的步骤如下：
在玻璃烧杯中注入去离子水，加入depc使其终浓度为0.05%~0.1%（depc-h2o）。（depc二焦---为活性很强的物，须在通风橱中小心使用）
将待处理的塑料制品放入一个可以高温灭菌的容器中，注入depc-h2o，使塑料制品的所有部分都浸泡到溶液中，在通风柜中37℃ 或室温下处理过夜。
将depc-h2o小心倒入废液瓶中，pcr，将装有depc- h2o 处理过的塑料制品的容器以铝箔封口，高温高压蒸汽灭菌至少30分钟。
灭菌塑料制品烘烤干燥，置洁净处备用。
玻璃和金属物品250 ℃烘烤3小时以上。
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