实时荧光定量pcr-凉山pcr-英瀚斯生物科技

rna提取及注意事项

研究基因的表达和调控时，需要从组织或细胞中分离纯化rna。rna的高低经常影响rt-pcr、cdna库构建和northern blot等分子生物学实验的成败。

主要试剂

trizol是一种新型总rna抽提试剂，内含异---胍等物质，凉山pcr，能迅速破碎细胞，抑制细胞释放出的---酶。

1.

trizol试剂含有，具有毒性和---性，注重操作。

2.

rnase污染的主要来源是操作过程中手和空气中的浮沉，---多少钱，注重配带手套，---怎么做，样品尽可能盖严。

3. 细胞裂解必需充分且操作迅速。裂解不完全会降低后得率，因为一部分rna会残留在未裂解的细胞中。细胞裂解之后要看不见颗粒状物质（结缔组织和骨除外）。在清洗和裂解细胞时在低温下操作，防止在操作过程中释放的内源rnase降解了rna。

4. 酵母和一些---由于细胞壁的---结构，可以加入trizol试剂同时加入无rnase的玻璃珠并剧烈振荡，使细胞裂解充分。

2-8℃ 避光保存一年。