磁性细胞标记方式
应用macs技术进行磁性细胞分选重要的一点是高的标记。要尽可能地增强阳性细胞的标记，并减弱背景染色。有两种基本的磁性标记方式:直接标记和间接标记。
1、直接磁性细胞标记(direct ---ic cell labeling)
(磁珠结合的细胞就是所要分离获得的细胞)直接标记是快速、zui特异的磁性标记方法。目前有多种分选人、小鼠、大鼠以及非人类灵长类细胞的macs直标微珠可供选用。
2、间接磁性细胞标记(indirect ---ic cell labeling )
(磁珠结合不需要的细胞，---，游离于磁场的细胞为所需细胞)间接磁性细胞标记需要联合使用单ke隆或者多ke隆抗ti和macs间标微珠。未结合抗ti、生物素化抗ti或者荧光素标记抗ti均可作为一抗标记细胞，再使用抗免yi球蛋白微珠、抗生物素或链霉亲和素微珠、抗荧光素微珠作为二抗磁性标记细胞。几乎针对任何种系任何细胞的任何一种单抗或多抗，均可用于间接标记。间接标记主要在如下情况时选用:当没有直标磁珠时;需要用几种抗ti的混合物同时分选或去除多种类型的细胞;间接标记有放大作用，因此可在磁性分选抗原表达弱的目的细胞时使用;使用自备或者配体的磁珠分选中。( -般而言，阴性分离法的磁珠用量比阳性分离法的大，阳性分离法用行更多。)
2、快速脂质体转染法操作步骤如下 [方法二]：
(1) 以 5×105 细胞/孔接种 6 孔板 (或 35 mm 培养皿) 培养 24 小时，使其达到 50～60% 板底面积。
(2) 在试管中配制 dna/脂质体复合物方法如下：
在 1 ml 无 dmem 中稀释 psv2-neo 质粒 dna 或供体 dna。
旋转 1 秒钟，再加入脂质体悬液，旋转。
室温下放置 5～10 分钟，细胞培养，使 dna 结合在脂质体上。
(3) 弃去细胞中的旧液，用 1 ml 无 dmem 洗细胞一次后弃去，向每孔中直接加入 1 ml dna/脂质体复合物，37℃ 培养 3～5 小时。
(4) 再于每孔中加入 20%fcs 的 dmem，继续培养 14～24 小时，细胞，
(5) 吸出 dmem/dna/脂质体混合物加入新鲜 10%fcs 的 dmem，2 ml/孔，再培养 24～48 小时。
(6) 用细胞刮或---法收集细胞，以备分析鉴定。
3、稳定的脂质体转染方法如下：
(1) 接种细胞同前，细胞长至 50% 板底面积可用于转染。
(2)dna/脂质体复合物制备转染细胞同前 (2)、(3) 步骤。
(3) 在每孔中加入 1 ml、20%fcs 的 dmem，37℃ 培养 48 小时。
(4) 吸出 dmem，用 g418 选择培养液稀释细胞，使细胞生长一定时间，筛选转染，方法参照细胞筛选法进行。
细胞培养中常见的污染及解决方法
---污染
---污染后，单细胞测序，培养基一般清澈，保持原色。细丝可以在显微镜下观察到。，一些---类似于---碎片，但其中许多清晰可见，看起来像珊瑚，比较容易区分。此外，它们会慢慢长出细细的黑色细丝，因为它们生长得比较慢，不像---那样容易被发现，一旦发现培养基被污染，它们将很难存活。
解决方法：一旦被---污染，果断丢弃，然后对细胞房、co2 培养箱、器皿和培养基进行消毒。
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