三、实验指标区域指标开臂1停留时间、活动路程、进入次数、潜伏期、平均速度(x轴投影速度)开臂2停留时间、活动路程、进入次数、潜伏期、平均速度(x轴投影速度)开臂3停留时间、活动路程、进入次数、潜伏期、平均速度(x轴投影速度)其他臂停留时间、活动路程、进入次数、潜伏期、平均速度(x轴投影速度)四、实验方法及应用
1) 动物适应实验环境1周后,称重,禁食24小时。此后每天训练结束后---性地给予正常食料(据体重不同,大鼠16-20g,动物模型,小鼠2-3g),以使体重保持在正常进食大鼠的80%~85%。
2) 第二天,迷宫各臂及中央区分撒着食物颗粒(每只4~5粒,直径约3~4mm)。然后,同时将4只动物置于迷宫中央(通往各臂的门打开)。让其自由摄食、探究10min。
3) 第三天,重复第二天的训练。这一过程让动物在没有很强的应激条件下熟悉迷宫环境。
4) 第四天起,动物模型实验公司,动物单个进行训练:在每个臂靠近外端食盒处各放一颗食粒,让动物自由摄食。食粒吃完或10min后将动物取出。
5) 第五天,将食物放在食盒内,重复前---的训练,---2次。
6) 第六天以后,随机选4个臂,每个臂放一颗食粒;各臂门关闭,将动物放在迷宫中央;30s后,臂门打开,让动物在迷宫中自由活动并摄取食粒,直到动物吃完所有4个臂的食粒。如经10min食粒仍未吃完,则实验终止。每天训练两次,其间间隔1h以上。
敲低效果验证方法:
rt-pcr
检测mrna,是否仍存在靶 mrna?或是否敲低成功?
这种方法非常灵敏,但无法准确预测蛋白质水平。
蛋白质印迹实验
使用抗ti来检测样品中的靶蛋白表达以及多种相关蛋白质表达,从而观察靶蛋白敲除对其它蛋白质的影响。
免yi细胞化学法
可检测是否存在敲低蛋白。
其优势在于利用双重染色法,可同时检查敲除对其它蛋白质表达的影响以及其它蛋白质在细胞中的位置。
40只肥胖敏感大鼠按体重随机分为4组,基因敲除小鼠,分别为模型对照组和三剂量组。每周记录喂食量、洒食量、剩食量,称体重1次。模型对照组及三个剂量组给予高热量模型饲料,空白对照组给予维持饲料。各剂量组给予不同剂量的供试品灌胃,模型对照组和空白对照组给予等量的相应溶剂,供试品给药时间为6周,但不超过10周.试验结束后,称体重,动物模型制作公司,ma醉,解剖shen脏周围的脂肪和gao丸周围的脂肪,称重,计算体脂比。
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